丹参酮ⅡA对DN血瘀证TGF-β1和NF-κB通路交互作用的研究.pdfVIP

B通路的影响。 在细胞实验中，体外高糖培养大鼠肾系膜细胞(HBZY．1)，使用MTT技术观察 1与NF． 高糖环境对大鼠肾系膜细胞增殖的影响，使用siRNA技术探讨细胞内TGF．B K A B通路交通对话的机制，使用M1vr计数、qRT—PCR观察活血中药成分丹参酮II 对大鼠肾系膜细胞的影响及其对TGF．131与NF—KB通路对话的干预作用。 结果 1、文献研究 文献研究结果显示，糖尿病肾病是糖尿病的重要并发症，具有发展迅速，预后不 良等特点，已经成为影响人类健康的公共卫生问题，既往在病因病机探讨中，围绕禀 赋不足、饮食失节、情志失调、劳欲过度等进入探讨，病机为正虚基础上出现痰、瘀、 浊、毒等病理产物，相互胶结，对人体产生持续损伤。血瘀是影响DN发生、发展及 转归的一个关键因素。中医在治疗DN本虚的同时，往往兼顾治疗患者的血瘀、水湿、 痰浊、湿毒等。现代研究提示，炎症反应贯穿于糖尿病肾病的全程，TGF．131与NF． KB通路对话影响着疾病的进展，但仍未有确切的治疗方法和药物。 2、临床研究 临床结果表明：(1)血瘀证占DN患者的74．2％，是主要的证型，血瘀证与糖尿 病肾病的病程密切相关。DN的血瘀证在血小板、全血粘度(高切)、全血粘度(低 切)(50s—1)及血沉方程K值明显升高，提示血瘀是DN重要的病理产物。(2)与 非血瘀证患者相比，血瘀证患者在单位时间内，24h尿蛋白定量及GFR呈现明显的动 态变化，血清中TGF．B1、NF．KB出现明显的升高，提示血瘀是促进DN进展的重 要因素，并与炎症因子及相关通路活化有关。 (3)目前活血化瘀的用药规律分析， 使用频次依次为丹参、川芎、益母草、红花、牡丹皮、大黄。反映了医家多以和血类 及活血类药物为主，破血类药物较少。 3、实验研究 在STZ诱导的DN大鼠模型中，出现精神萎靡、饮水量增多、尿量增多、形态消 瘦等与DN临床类似症状，尿蛋白和空腹血糖明显升高，给予丹参酮IIA干预后，上 述症状得到改善，尿蛋白与空腹血糖下降，病理提示肾脏损害减轻，可能与下调TGF． Bl与NF．KB，上调Smad7有关。 高糖诱导F大鼠肾系膜细胞随着时间的延长，细胞明显增多，72hMTT计数结果 及较实验前具有明显的差异。给予丹参酮IIA药物进行干预后，系膜细胞的增殖作用 减弱，而且，高浓度的丹参酮IIA(100lamol／L)较低浓度(10umol／L)的作用更为 明显。在高糖诱导的系膜细胞中加入siTGF．B1，系膜细胞增殖减少，NF．KB的表达 降低，而Smad7的表达上升；加入siP65(NF．KB的重要分子)，系膜细胞增殖减少， TGF．131的表达降低，而Smad7的表达上升。 结论 l、文献研究 糖尿病肾病是糖尿病的重要并发症，血瘀是影响DN发生、发展及转归的一个关 键因素。中医在治疗DN时，活血化瘀贯穿于始终。 2、临床研究 血瘀证与糖尿病肾病的病程密切相关。血瘀不仅是DN重要的病理产物，也是促 进DN进展的重要因素。血瘀并与TGF．131、NF．K B通路活化相关。在治疗DN血 瘀证中，多以和血类及活血类药物为主，破血类药物较少使用。 3、实验研究 丹参酮IIA可能通过下调TGF．tBl与NF—K B，上调Smad7改善DN肾脏损害。 在大鼠肾脏系膜细胞中，存在着TGF．131与NF．KB通路的交互对话， Smad7是其 中重要的节点，丹参酮IIA可通过下调TGF．131与NF．K B，上调Smad7抑制高糖对 系膜细胞的增殖作用。 关键词： 糖尿病肾病：血瘀；TGF．131；NF．K B；丹参酮IIA III TheResearchofDNratTGF—B1