姚扬明毕业答辩.pptVIP

内容纲要 内容纲要 研究背景 促红细胞生成素是一个糖蛋白激素，包含了166个氨基酸形成的单个多肽，折叠成4个α-螺旋，在半胱氨酸6与161和半胱氨酸29与33之间形成两个二硫键 。 O-2A收集过程中,混存于T1As中的O-2A 内容纲要 目的与意义 内容纲要 实验方法 MTT法确定EPO的最适浓度； EPO处理混存于1型星形胶质细胞间的O-2A祖胞； MTT法检测不同条件培养基对O-2A祖细胞增殖力的影响； 收集EO-2A祖细胞，细胞培养观察并计数； 免疫荧光细胞化学技术检测EO-2A祖细胞及其分化细胞的抗原表型。 内容纲要 EO-2A祖细胞与O-2A祖细胞的生长曲线 免疫荧光化学法显示EO-2A祖细胞表达NG2, A2B5, Nestin 免疫荧光化学法显示EO-2A祖细胞表达NG2, A2B5, Nestin 内容纲要 讨论 星形胶质细胞条件培养液对O-2A祖细胞具有增殖作用。 [Noble M, EMBO J, 1984] 星形胶质细胞在微环境下可分泌产生多种细胞因子：如PDGF，CNTF，IGF-1，VEGF-A等，其中PDGF是促使O-2A祖细胞发生增殖主要有丝分裂原。 [bajetto A, Brain Res, 1999] PDGF可以与O-2A祖细胞胞膜上的PDGF-R结合，刺激细胞在S期合成DNA，提高细胞间的c-AMP水平，并能提高其存活率。 [Gao FB, Curr Biol, 1997] 讨论 1型星形胶质细胞的直接接触发挥作用而间接的细胞培养液却并不发挥作用。 [Gordon GR, Glia, 2007] 星形胶质细胞间隙连接在少突胶质祖细胞的增殖分化中发挥重要作用。 [王凌云，《中国解剖学会2011年年会论文文摘汇编》] EPOR在T2As中基因转录水平明显高于OPC和OLs。 [Hu JG, Tohoku J. Exp. Med, 2011] 增殖的O-2A祖细胞胞膜CNTFR结合CNTF，激活JAK/STAT信号传导途径，上调A2B5和GFAP的表达，促进O-2A祖细胞分化成T2As。 [Krzan M, J Neurosci Res, 2001] 讨论 本研究首次将EPO应用于处理混存于T1As之间的O-2A祖细胞，引起O-2A祖细胞的大量增殖。免疫荧光化学染色鉴别增殖细胞的表面抗原没有改变，且具有较强的细胞活力，为能有效利用这些混存于T1As之间的O-2A祖细胞提供了方法学上的参考。 比较分析了EO-2A祖细胞与正常的O-2A祖细胞在增殖与分化等生物学特性不同。发现EO-2A祖细胞细胞活力强且更易于分化成T2As，而T2As具有某种干细胞的潜能，可诱导分化成神经元。而本研究得到的EO-2A祖细胞能否作为细胞移植治疗神经系统相关疾病的移植细胞还有待进一步的研究探讨。 内容纲要 结论 EPO能使混存于T1As之间的O-2A祖细胞大量增殖，且这种增殖作用依赖于T1As与O-2A祖细胞的接触。 与正常培养的O-2A祖细胞相比，EO-2A祖细胞的细胞突起更长，且更易于诱导分化为T2As。这可能为研究治疗中枢神经系统疾病提供理想的细胞移植材料。 衷心感谢我的导师夏春林教授！ 感谢答辩委员会主席及答辩委员会委员！ 感谢解剖与组胚教研室全体老师和同学！ 感谢我的家人和朋友！ 免疫化学法检测EO-2A祖细胞所分化的细胞表面抗原 T2As OLs 实验结果 | 研究背景 | 目的与意义 | 实验方法 | 实验结果 讨论 | 结论 | 研究背景 | 目的与意义 | 实验方法 | 实验结果 | 讨论 结论 致 谢 * * * 促红细胞生成素对O-2A祖细胞生物学特性的影响 研究生:姚扬明 导 师:夏春林 教授 苏州大学解剖学系暨细胞神经生物研究室 | 研究背景 | 目的与意义 | 实验方法 | 实验结果 | 讨论 | 结论 研究背景 | 目的与意义 | 实验方法 | 实验结果 | 讨论 | 结论 Syed RS, et al. Nature, 1998, 395: 511-516 EPO结构 EPO表达 表达于CNS，脑脊