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第一章 绪论
1、证明DNA是遗传物质基础的几个相关实验。
(1)1928年英国微生物学家 Griffith.F 做了肺炎双球菌的实验转化实验。发现肺炎双球菌使小鼠死亡的原因是引起肺炎;
(2)1944年,美国微生物学家Avery 及其同事进行的肺炎球菌实验证明基因就是DNA分子,提出DNA是遗传信息的载体。而过去 认为蛋白质是遗传的基础。
(3)1952年,美国Hershey和Chase做了噬菌体侵染细菌实验。证明噬菌体在传代过程中发挥作用的物质可能是DNA,而不是蛋白质。(35S、32P-DNA)
2、分子生物学发展历史
(1)准备和酝酿阶段(19世纪后期到20世纪50年代初)
①确定了蛋白质是生命的主要物质基础;
Sumner在1936年证实酶是蛋白质。
Sanger于1953年利用纸电泳及层析技术首次阐明胰岛素的一级结构。
Kendrew和Perutz利用X射线衍射技术解析了肌红蛋白(myoglobin)及血红蛋白(hemoglobin)的三维结构。
②确定了生物遗传物质基础是DNA
1928年,英国微生物学家 Griffith.F 做了肺炎双球菌的实验转化实验。
1944年,美国微生物学家Avery 证明基因就是DNA分子,提出DNA是遗传信息的载体,而过去 认为蛋白质是遗 传的基础。
(2)现代分子生物学的建立和发展阶段( 20世纪 50年代初到70年代初)
①DNA双螺旋结构模型(1953)(现代分子生物学诞生的里程碑)
1953年,美国科学家Watson 和英国科学家Crick提出 DNA Double Helix model
通过对DNA 分子的X射线衍 射研究证实了前两者提出的DNA 的模型
②1954年Crick提出中心法则。
③1958年Meselson和Stahl证明DNA半保留复制
④1961年,法国科学家Jacob(雅各布) 和Monod(莫诺)提出操纵子学说
⑤1968年,Nirenberg、Holly和Khorana由 于破译了遗传密码而分享诺贝尔生理医学奖。
(3)现代分子生物学深入发展的阶段
①重组DNA技术的建立和发展
1972年, Boyer获得第一个重组DNA分子
1977年,Sanger等人发明了一种DNA序列测定方法(双脱氧链终止法)1980年,与Gilbert 和Berg共享诺贝尔化学奖
②单克隆抗体及基因工程抗体技术
第二章 染色体与DNA
1、染色体的基本特征:(1)结构相对稳定;(2)能够自我复制,从而保证亲代与子代之间的遗传性状相对稳定;(3)指导蛋白质合成,从根本上控制整个生命过程;(4)能产生可遗传的变异;
2、染色体的结构和组成:
(1)原核生物没有真正的细胞核,DNA一般位于类核体上。细菌 DNA 是一条相对分子质量在 109 左右的共价、闭合双链分子。
原核生物DNA的主要特征:原核生物中一般只有一条染色体且大都带有但拷贝基因,只有很少数基因(如rRNA基因)是以多拷贝形式存在的;整个染色体DNA几乎全部由功能基因和调控序列所组成;几乎每个基因序列都与它所编码的蛋白质序列呈线性对应状态。
(2)真核生物染色体由蛋白质和DNA组成。蛋白质包括组蛋白,非组蛋白。组蛋白是染色体的结构蛋白,它与 DNA 组成核小体。组蛋白分为 H1 、H2A 、 H2B 、H3 及 H4 。这些组蛋白都含有大量的赖氨酸和精氨酸。
组蛋白的特性(看): ①进化上的极端保守性 ②无组织特异性
③肽链上氨基酸分布的不对称性(碱性半条链易于和 DNA 的负电荷区结合,另外半条链与其他组蛋白、非组蛋白结合)
④组蛋白的修饰作用(发生在细胞周期的特定时间,组蛋白的特定位点。)
3、C 值:通常指一种生物单倍体基因组 DNA 的总量
最大C值:基因组中总 DNA 量,单倍体基因组总DNA 量
最小C值:编码信息基因的总 DNA量
C值矛盾(C值反常现象):真核基因组含有大量的重复序列,功能 DNA 的序列被大多数不编码蛋白质的非功能 DNA 所隔开 (G+C)
4、真核细胞 DNA 序列分类:①不重复序列 ②中度~ ③高度重复序列(卫星)
5、(1)染色质组成:染色质的电子显微镜图显示出由核小体组成的念珠状结构,可以看到由一条细丝连接着的一连串直径 10nm 的球状体。
(2)核小体组成:核小体是由 H2A、H2B、H3、H4各两个分子生成的八聚体和由大约 200bp DNA 组成的。八聚体在中间,DNA分子盘绕在外,而H1则在核小体的外面。每个核小体只有一个H1。
6、原核生物基因组结构特点:(1)结构简练 (2)存在转录单元(多顺反子mRNA) (3)有重叠基因
7、真核生物基因组结构特点:(1)真
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