第四篇 遗传与变异 23 重组DNA技术 23 重组DNA技术 重组DNA技术,也称基因工程或遗传工程。 基因工程是指将特定的基因(即外源基因),通过载体或其它手段送入受体细胞,使它们在受体细胞中与受体细胞的基因进行重组,并能增殖、表达,这样一种遗传学操作。 基因工程的主要目的:通过与优良性状相关的基因的重组,获得具有高度应用价值的新物种或新产品。 23 重组DNA技术 23.1 基因工程的相关技术 23.1.1 核酸的分子杂交 1. DNA的变性与复性 DNA变性 较高温度DNA解链成单链。 DNA复性 变性的DNA逐渐冷却,分离的两条单链通过碱基互补配对重新恢复成双链的DNA分子。 短链容易精确复性;长链复性较难。 杂交分子 不同来源的单链DNA,只要碱基序列大部分互补,就可以复性。 DNA与RNA之间,也一样可以通过碱基互补配对形成杂交双链分子。 23 重组DNA技术 2. 分子探针寻找特定基因 放射性标记的DNA或RNA分子。 3. Southern印迹 可以检测特定的DNA序列。 23 重组DNA技术 4. Northern印迹 可以检测特定基因的表达情况。 5. 原位杂交 可以检测特定细胞中某一基因的表达情况。 23 重组DNA技术 23.1.2 PCR 1. PCR技术的基本原理 PCR反应过程: ●双链DNA变性(9
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