2016高中生物专题2第2节第2课时动物细胞融合与单克隆抗体课件新人教版选修3分析.ppt

思 维 升 华 1．植物体细胞杂交和动物细胞融合的区别 项目 细胞融 合原理 细胞融 合方法 诱导因素 用途 植物体 细胞杂 交 细胞膜的流动性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 离心、电激、聚乙二醇等 克服远缘杂交不亲和的障碍，获得杂种植株 动物细 胞融合 细胞膜的流动性 使细胞分散后，诱导细胞融合 离心、电激、聚乙二醇、灭活的病毒等 制备单克隆抗体等 2.动物细胞融合与受精作用的区别 (1)受精作用是在同种生物之间进行的，精子与卵细胞的融合不需要任何诱导剂，就能形成受精卵，受精卵内具备同种生物的两个亲本的遗传物质。 (2)动物细胞融合是在不同物种间进行的细胞融合，由于物种间存在生殖隔离，所以自然条件下不能融合成杂交细胞，必须有诱导剂作用才能融合。形成的杂交细胞具备两个亲本细胞的遗传物质，从而体现两个亲本的遗传特性。 3．制备单克隆抗体时，选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的原因 哺乳动物感染抗原后，其体内会形成相应的效应B淋巴细胞，效应B淋巴细胞能分泌相应的抗体凝聚或杀死这些抗原。动物在免疫反应的过程中，每一种效应B淋巴细胞能分泌一种特异性抗体，要想获得大量的特异性抗体，必须使能分泌该单一抗体的效应B淋巴细胞大量增殖。效应B淋巴细胞具有产生单一抗体的能力，但不能在体外增殖；骨髓瘤细胞能在体外培养条件下无限增殖，但不能产生抗体。因此，把一种效应B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，产生杂交瘤细胞，它会兼有两个亲本细胞的特性，在体外培养条件下能不断增殖，同时能产生出某种特异性的抗体。 4．动物细胞融合、单克隆抗体制备与动物细胞培养的区别与联系 动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，也叫细胞杂交。杂交细胞是具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。杂交细胞的形成需要人工诱导，常用的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。融合的细胞要繁殖就要进行动物细胞的培养，通过动物细胞的培养，杂交细胞表现出两个亲本各自的优良特点。 单克隆抗体的制备，首先应获得杂交瘤细胞，其过程是用已免疫的效应B淋巴细胞和骨髓瘤细胞杂交获得三种融合细胞：BB细胞、B瘤细胞、瘤瘤细胞，然后用选择培养基筛选获得杂交瘤细胞，杂交瘤细胞要发挥其繁殖快，产生特异性抗体的优点，应通过动物细胞培养才能实现。所以无论是动物细胞融合还是单克隆抗体的制备，都是以动物细胞培养为基础的。 知 识 构 建 应 用 探 究 人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答： (1)制备单克隆抗体过程中要用到________和________技术。 (2)制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于________，使小鼠产生分泌相应________的淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的________免疫。 (3)在细胞内DNA合成一般有两条途径，主途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化作用合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。 ①利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基(含有次黄嘌呤、氨基嘌呤和胸腺嘧啶核苷的细胞培养基)含有多种成分，其中添加的________成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。 ②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是________________________________ (4)此过程生产的单克隆抗体可以与________特异性结合，从而诊断早孕。 [解析]　(2)通过分泌抗体来消灭抗原的过程属于体液免疫。(3)经细胞融合处理过的细胞中，能在体外无限增殖的有瘤细胞、瘤—瘤杂交细胞以及杂交瘤细胞。而根据题中信息可知，骨髓瘤细胞和瘤—瘤杂交细胞的DNA合成没有“次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷”的辅助途径，只能进行由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA的主途径。因此，如果在培养基中加入氨基嘌呤，即可阻断DNA合成的主途径，使得骨髓瘤细胞和瘤—瘤杂交细胞无法合成DNA，进而无法增殖。 而骨髓瘤细胞中由于有B淋巴细胞的遗传特点，有DNA合成的辅助途径，因此即使在有氨基嘌呤的培养基上，只要同时存在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷，依然能够正常合成DNA，正常增殖，最终达到筛选出杂交瘤细胞的目的。(4)通过此过程生产的单克隆抗体能与最初注射的抗原特异性结合，在本题中该抗原为HCG(人绒毛膜促性腺激素)。 [答案]　(1)动物细胞培养　动物细胞融合 (2)抗原　抗体　体液 (3)①氨基嘌呤　②能无限增殖并分泌特异性抗体 (4)人绒毛膜促性腺激素(或“HCG”) 专题二　第二节　第二课时 成才之路 · 高中新课程 · 学习指导 · 人