1分子生物学常用技术DNA测序和基因芯片解说.pptVIP

2): siRNA在细胞内RNA解旋酶的作用下解链成正义链和反义链，反义siRNA再与体内一些酶(包括内切酶、外切酶、解旋酶等)结合形成RNA诱导的沉默复合物(RNA-induced silencing complex，RISC)。RISC与基因表达的mRNA的同源区进行特异性结合，RISC具有核酸酶的功能，在siRNA中反义链互补结合的两端切割mRNA。被切割后的断裂mRNA随即降解，从而诱发宿主细胞针对这些mRNA的降解反应。 siRNA不仅能引导RISC切割同源单链mRNA， 可作为引物与靶RNA结合并在RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase，RdRP)作用下合成更多新的dsRNA，新合成的dsRNA再由Dicer切割产生大量的次级siRNA，从而使RNAi的作用进一步放大，最终将靶mRNA完全降解。  3. RNAi 的作用特点 (1)“共抑制”: RNAi 使外源基因同源的内源基因沉默 (3) 特异高: RNAi能特异性降解mRNA单个碱基的改变即可使RNAi失效。 (4)穿透能力强: RNAi能在不同的细胞间长距离传递 (2)效率高: 效率比单纯反义或正义RNA 的抑制效率高 100fold, 使靶基因表达降到很低水平甚至完全“剔除” (knockdown) 。它比基因敲除技术(knocko