二 、DNA复制的起点和方式 用遗传学和生物化学的方法可以确定大肠杆菌染色体DNA的复制起点在基因图谱上的位置。 DNA聚合酶催化的链延长反应 2.大肠杆菌DNA聚合酶 大肠杆菌三种DNA聚合酶比较 聚合酶IV 和V: 1999年发现,它们涉及DNA的错误倾向修复 (error prone repair) 连接酶连接切口 RNA引物的合成: 以DNA为模板,NTP为原料,在引物合成酶催化下,合成10-几十个核苷酸。 为什么? 这是保证DNA聚合过程高度精确的又一措施。已知DNA 聚合酶具有3??5?外切酶功能校对复制过程中的核苷酸,也就是说聚合酶在开始形成一个新的磷酸二酯键前,总是检查前一个碱基是否正确,它不能从头开始合成。因此先合成一条低忠实性的多核苷酸来开始DNA的合成,并以核糖核苷酸来表示是“暂时”的,当DNA聚合以后再将其切除,以高忠实性的脱氧核苷酸取而代之,确保复制的忠实性。 DNA复制的调节 DNA复制的调节在起始阶段,一旦开始就一直到完 DNA复制的起始与DNA的甲基化和细菌质膜的相互作用有关 oriC 位点的回文序列GATC(11个)的甲基化 新合成链的甲基化滞后13 min→半甲基化DNA 半甲基化DNA与质膜结合→阻止Dam甲基化酶的作用、抑制Dna蛋白与起点的结合 随质膜生长,DNA移向细胞两半部分→DNA脱落→甲基化→
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