第四章蛋白质的生物合成讲课.ppt

* * * * * * * * * * * * 五 多肽链合成后的加工修饰 新生的多肽链大多数是没有功能的，必须经过加工修饰才能转变为有活性的蛋白质。 1．N端甲酰蛋氨酸或蛋氨酸的切除： 蛋白质刚刚被合成时，都以fMet（原核）或Met（真核）开始，多肽合成后， N端甲酰蛋氨酸，必须在多肽链折迭成一定的空间结构之前被切除。 2．特定氨基酸的修饰： 氨基酸的侧链修饰作用包括：磷酸化、糖基化、甲基化、乙基化、羟基化、羧基化等。 3．二硫键的形成： mRNA上没有胱氨酸的密码子，多肽链中的二硫键，是在肽链合成后，通过二个半胱氨酸的疏基氧化而形成的。二硫键的形成对于许多酶和蛋白质的活性是必需的。 4．肽段的切除： 许多新合成的肽链要切除非功能段（如信号肽、C－肽）才具有活性。胰岛素、血纤维蛋白、胰蛋白酶等。 如：前胰岛素原（切信号肽）→胰岛素原（切间插序列：C－肽） →胰岛素 前胰岛素原的加工 　　　六、蛋白质运转机制 　　不论是原核还是真核生物，在细胞浆内合成的蛋白质需定位于细胞特定的区域，有些蛋白质合成后要分泌到细胞外，这些蛋白质叫做分泌蛋白。 在细菌细胞内起作用的蛋白质一般靠扩散作用而分布到它们的目的地。 　　真核生物细胞结构更为复杂，而且有多种不同的细胞器，它们又具有各不相同的膜结构，因此合成好的蛋白质还要面临跨越不同的膜而到达细胞器，有些蛋白质在翻译完成后还要经过多种共价修饰，这个过程叫做翻译后处理。 几类主要蛋白质的运转机制： 蛋白性质 　　　转运机制 　　　主要类型 分泌 在结合核糖体上合成，以翻译-转运同步机制运输 免疫球蛋白、卵蛋白、水解酶、激素 细胞器发育 在游离核糖体上合成，以翻译后转运机制运输 核、叶绿体、线粒体、乙醛酸循环体、过氧化物酶体等细胞器中的蛋白质 膜的形成 两种机制都有 质膜、内质网、类囊体中的蛋白质 （一）翻译-运转同步机制(分泌蛋白途径) 翻译－运转同步机制：蛋白质的合成和运转是同时发生的。分泌蛋白大多是以翻译－运转同步机制运输的。 分泌蛋白:通过内质网分泌到cell外或细胞间质中的蛋白。分泌蛋白的氨基末端通常带有一段信号肽序列。 信号肽:进入内质网的蛋白质N端有一段长13-36个氨基酸的疏水性肽段，在成熟的分泌蛋白中并不存在，能够引导多肽链穿过ER膜进入ER腔，称为信号肽。 信号肽的特点： ⑴整体上是一段疏水的肽段； ⑵信号肽一般位于N端，进入ER膜后被信号肽酶水解； ⑶信号肽的中部常常由10-15个残基构成疏水性区域，前端常常有几个带正电荷的碱性氨基酸，后端为含丙氨酸的区域； ⑷离信号肽酶的水解位点最近的氨基酸往往是带有很短侧链的丙氨酸或甘氨酸； 1、 SRP与核糖体上新生蛋白的信号肽相结合并使新生肽链的延伸暂时受阻。（这一作用只有在新生肽链达到大约70个氨基酸长时才发生,因为这时信号序列才从核糖体中冒出来,而余下的30个～40个氨基酸仍然处于核糖体内。） 信号肽介导的蛋白质跨膜运输过程 SRP(信号识别蛋白)和DP（停靠蛋白，又称SRP受体蛋白）介导了蛋白质跨膜运输的过程。 2、SRP－信号肽－多核糖体复合物被引向内质网膜并与SRP的受体－－DP相结合。（SRP对翻译的阻断是暂时的,当它碰到粗面内质网膜上的停泊蛋白〈docking protein)时,就不再阻止核糖体的翻译。这时,SRP离开核糖体而去识别新的信号序列；而核糖体则通过信号肽与粗面内质网膜相连。） 3、信号肽部分通过膜上的核糖体受体及蛋白运输复合物跨膜进入内质网腔。新生肽链重新开始延伸。 4、整个蛋白跨膜以后，信号肽被水解，形成高级结构和成熟型蛋白质，并运输到相应的细胞器。 易位子 （二）翻译后运转机制 Rough ER上的蛋白质常常通过运转载体将经过修饰的蛋白质送入高尔基体，再分别送到各个亚细胞位点。叶绿体和线粒体中有许多蛋白质和酶是在细胞质中合成的，其中绝大多数以翻译后运输机制进入细胞器内。 线粒体蛋白质跨膜运转 叶绿体蛋白质跨膜运转 （1）线粒体蛋白质跨膜运输 线粒体有大约700种蛋白质，其中13种由线粒体基因编码，其它的由核基因组编码。 线粒体蛋白质跨膜运输的特点： 1、运输的是翻译结束后的完整蛋白质前体；由成熟蛋白质加上N末端的一段前导肽（leader peptide）组成。 2、是一个需能过程。 3、蛋白质通过线粒体膜运转时，首先由外膜上的Tom受体复合蛋白识别与Hsp70或MSF (线粒体输入刺 激因子(mitochondrial-import stimulation factor, MSF) )等分子伴侣相结合的待运转多肽，通过Tom和Tim组成的膜通道进入线粒体内腔。 （2）叶绿体蛋白质