蛋白质工程1研讨.ppt

蛋白质工程(Protein Engineering)－绪论 一 蛋白质工程的含义 以蛋白质的结构和功能的关系研究为基础，利用基因工程技术对现存的蛋白质加以改造，按照人类自身的需要，组建成新型蛋白质的现代生物技术 二 蛋白质工程的诞生 一张蓝图 上世纪70年代，特别是80年代初结构生物学揭示了大量蛋白质分子的精确立体结构及其与复杂生物学功能的关系，为设计改造天然蛋白质提供了蓝图 一项工具 分子遗传学发展了以定点诱变为中心的基因操作技术，为通过基因修饰改造蛋白质提供了工具。 1、蛋白质工程与发酵工程 2、蛋白质工程与基因工程 3、蛋白质工程与细胞工程 4、蛋白质工程与酶工程 5、蛋白质工程与生物信息技术 6、蛋白质工程与结构分析、遗传物质的研究 蛋白质工程的应用 医药领域－白细胞－2，β－干扰素，尿激酶，人胰岛素，病毒疫苗，嵌合抗体和人源化抗体 生物材料设计－骨形态发生蛋白－2 能源领域 农业领域 工业领域 环境领域 ——蛋白质工程与基因工程的区别 基因工程是通过基因操作把外源基因转入适当的生物体内，并在其中进行表达，它的产品还是该基因编码的天然存在的蛋白质（第一代）。 蛋白质工程则更进一步根据分子设计的方案，通过对天然蛋白质的基因进行改造，来实现对其所编码的蛋白质的改造，它的产品已不再是天然的蛋白质，而是经过改造的，具有了人类所需要的优点的蛋白质。（第二代基因工程）。 五、蛋白质工程的程序和操作方法 蛋白质工程主要是研究蛋白质的分离纯化、蛋白质的结构与功能分析、设计及预测，通过基因工程手段进行蛋白质的改造与创造，其中对蛋白质结构与功能关系的研究是蛋白质工程的核心内容 ——蛋白质工程的程序 ——蛋白质工程的操作方法 主要参考书 1 《蛋白质工程》王大成等编著 2《PROTEIN STRUCTURE 》 Section 1.Primary structure, secondary motifs, tertiary architecture, and quaternary organization Jannette Carey and Vanessa Hanley Princeton University Princeton, NJ 08544-1009 提示： 酶工程就是指将酶所具有的生物催化作用，借助工程学的手段，应用于生产、生活、医疗诊断和环境保护等方面的一门科学技术。概括地说，酶工程是由酶制剂的生产和应用两方面组成的。酶工程的应用主要集中于食品工业、轻工业以及医药工业中。 第一章 蛋白质结构基础 第一节: 蛋白质结构的基本组件 第二节: 蛋白质结构的组织和主要类型 第三节: 蛋白质结构的形成---多肽链的生物合成与折叠 第一节 蛋白质结构的基本组件 一、天然常见氨基酸 二、肽单位和多肽链 三、α 螺旋 四、β层 五、环肽链 六、疏水内核 一、天然常见氨基酸 构成蛋白质分子的基本化学单位是氨基酸。在所有蛋白质中常见的天然氨基酸共20种。 在有机体内通过生物合成连接成多肽链，其顺序由编码基因中的核苷酸三联体遗传密码决定。 1．基本结构 20种常见氨基酸中，19种都具有如下共同的化学结构： 另有一种脯氨酸具有类似而不相同的化学结构。它们的侧链与主链N原子共价结合，形成一个亚氨基酸。结构的特殊性决定了脯氨酸功能的特殊性。 2．基本性质 20种不同的氨基酸侧链具有各种各样的化学特性，当它们以各种顺序结合成蛋白质分子时，其性质会有更多的变化，使其蛋白质的特性远不同于简单的有机分子。20种氨基酸侧链的性质是了解蛋白质的基本出发点。 （1） 疏水氨基酸 : Ile, Leu,Val, Pro, Phe, Ala, Met （2） 极性氨基酸: Ser Thr Asn Gln Cys His Tyr Trp （3） 荷电氨基酸 : Lys Arg, Asp Glu 3. 单一构型和旋转异构体 （1）构型与构象 Configuration Conformation （2）天然氨基酸的单一构型 （3）优势构象与旋转异构体 二、肽单位和多肽链 1．肽链和肽单位 (1)肽键与多肽 20种氨基酸在蛋白质中是通过肽键(peptide bond)连接在一起的。一个氨基酸的羧基与下一个氨基酸的氨基经缩合反应形成的共价连接称为肽键： 2．多肽链的构象 （1）扭角(torsion angle)或双面角(dihedral angle)系统 （2）多肽链的构象角 （3）Ramachandra构象图及多肽链构象的允许区 由4个原子或基团组成的系统投影在与B-C键正交的平面上，A-B键投影与C-D键投影之间的夹角