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第13章第35讲基因工程分析
在以往的高考题中,本章的考查常为材料分析题,并且大多数材料都属于当前生命科学研究的热点和前沿,这就要求考生在学习这部分知识的时候多关注相关信息的收集和整理。2010年开始广东地区开始理科综合测试,本章内容的综合性以及与必修本的联系及结合会更强,教师和考生备考时应多注意这个方面的训练。 本章知识属于必修模块知识的提升和应用,且本模块都是以工程作为专题的,所以知识点之间的逻辑联系相当紧密,这就要求考生在学习本章时要理清相关工程的实质,并从事物的核心原理上把握知识点之间的逻辑,从而理解知识,形成应用能力和迁移能力。 (3)限制性内切酶断裂的是DNA分子中 .的键,若是从一条DNA分子中切出一个完整的基因,那么需要断裂 个这样的键。 (4)DNA连接酶连接的是 键。 2.基因运载体的条件 (1)要保证能和目的基因进行连接,所以运载体上必须有 。 (2)运载体的目的是将目的基因导入受体细胞,所以目的基因应当能够在受体细胞中 ,并且能 ,以防止重组DNA丢失。 (3)为了方便检测目的基因是否导入受体细胞并表达,运载体最好有 存在。 3.基因工程的一般操作过程 (1)获取目的基因 ①酶切法 a.酶切法首先要求DNA分子中有 .存在,然后利用 将DNA分子在特定的酶切位点切成多个DNA片段。 b.由于限制性内切酶具有专一识别特定的脱氧核苷酸序列的特性,所以切出来的DNA片段的末端都是 ,需要进行 ,才能得到目的基因。 ②利用PCR技术扩增目的基因 使用PCR技术的前提是要有 ,其结果是产生更多的目的基因。原理 。 ③人工合成法 a.如果知道氨基酸的序列,通过推测计算出来的目的基因的脱氧核苷酸序列可能有好多种,其原因是 。 b.通过逆转录形成的目的基因的脱氧核苷酸序列具有惟一性,其原因是逆转录的过程中遵循 原则。 (2)基因表达载体的构建 ①首先用 将运载体切出一个具有相同末端的切口。 ②用 将目的基因和运载体的末端进行连接。 ③基因表达载体的基本组成为 、 、 、 。 ④意义:基因工程的 。 (3)将目的基因导入受体细胞 受体细胞不同,导入重组运载体的方法也不同,植物通常使用 ,动物使用 。 (4)目的基因的检测和鉴定 ①导入检测使用的是DNA探针,其中DNA探针的实质是 。 ②表达检测既可以检测 的产物,也可以检测的产物 。 5.蛋白质工程 基因工程原则上只能生产 .是 蛋白质,蛋白质工程是以 的关系作为基础,通过 或 ,对现有的蛋白质进行改造,或者制造出一种新的蛋白质的工程技术。 1.质粒或者运载体作为目的基因导入受体细胞的工具,必须具备下列要求:(1)能够在受体细胞中存在;(2)能够随着受体细胞DNA的复制而复制;(3)有特定的酶切位点,能够和目的基因连接;(4)通常具有标记基因,便于目的基因的检测和表达。准确把握每种需求的意义是解题的关键。 2.限制性核酸内切酶是将DNA切成片段,而DNA连接酶的作用与之相反,是将多个DNA片段连接成一个DNA,作用的化学键都是一样的,都是磷酸二酯键。 由题意知,该限制酶识别的核苷酸序列是GAATTC,专一切点是G和A。切出的两个完全相同的黏性末端是AATT和AATT,两个黏性末端的关系是碱基互补配对,解决此类型题的规律是DNA限制性内切酶具有专一性,专一识别特定的核苷酸序列和酶切位点,切出的DNA片段具有两个完全一样的黏性末端,并且这两个黏性末端碱基互补配对。 下列黏性末端属于同一限制酶切割而成的是( ) 首先判定相同的黏性末端才是由同一种限制酶切出的,然后要判定相同的两个黏性末端上的碱基是否互补配对。 质粒之所以能做基因工程的运载体,是由于它( ) A.含蛋白质,从而能完成生命活动 B.能够自我复制,而保持连续性 C.是RNA,能够指导蛋白质的合成 D.具有环状结构,能够携带目的基因 作为基因的运输工具——载体,必须具备的条件及理由是( ) A.能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制,以便提供大量的目的基因 B.具有多个限制酶切点,以便于目的基因的表达 C.具有某些标记基因,以便于目的基因的表达 D.能够在宿主细胞中复制并稳定保存,以便于进行筛选 多个酶切位点的存在是为了和目的基因的连接,而不是便于目的基因的表达,便于目的基因的表达则需要运载体能够随着受体细胞内DNA的复制而复制;标记基因的需求是为了便于目的基因的检测和表达。 DNA连接酶催
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