第14章DNA转录分析.pptxVIP

第 十 四 章;DNA;转录 (transcription) 转录是在 DNA的指导下的RNA聚合酶的催化下，按照硷基配对的原则，以四种核苷酸为原料合成一条与模板DNA互补的RNA 的过程。RNA的转录从DNA模板的特定位点开始，并在一定的位点终止。此转录区域为一个转录单位。;复制和转录的区别 ;参与转录的物质;模板和酶 Templates Enzymes;一、转录模板 ;;5′···GCAGTACATGTC ···3′;不对称转录(asymmetric transcription) ;;二、RNA聚合酶;核心酶 (core enzyme);RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合 ;（二）真核生物的RNA聚合酶 ;三、模板上酶的辨认、结合;RNA聚合酶保护法;;;转录过程 The Process of Transcription;（一）转录起始;2. DNA双链解开;（二）转录延长;转录空泡(transcription bubble)：;;依赖Rho (ρ)因子的转录终止 非依赖Rho因子的转录终止;A T P;2. 非依赖 Rho因子的转录终止;5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` ;茎环结构使转录终止的机理：;RNA合成过程;二、真核生物的转录起始;;2. 转录因子 ;参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ ;3. 转录起始前复合物 (pre-initiation complex, PIC) ;4. 模板理论(piecing theory) ;（二）转录延长;5?------AAUAAA-;真核生物和原核生物转录的差别;真核生物的转录后修饰 Post-transcriptional Modification;一、真核生物mRNA的转录后加工;帽子结构;（二）mRNA的剪接;真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。 ;2. 外显子(exon)和内含子(intron) ;鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图;3. mRNA的剪接;鸡卵清蛋白基因;pG-OH (ppG-OH, pppG-OH);? RNA编辑作用说明，基因的编码序列经过转录后加工，是可有多用途分化的，因此也称为差别加工(differential RNA processing)。;二、tRNA的转录后加工;;;碱基修饰;三、rRNA的转录后加工;四、核 酶;四膜虫rRNA内含子的二级结构;最简单的核酶二级结构——槌头状结构 (hammerhead structure);核酶研究的意义;人工设计的核酶;;北京兄弟搬家公司/ 0 仐摋意