第二章：代谢控制发酵的基本思想资料.pptVIP

第二章：代谢控制发酵的基本思想 目的 了解微生物细胞的调节机制、掌握代谢 控制发酵的基本思想及微生物代谢控制 发酵的措施 内容 微生物细胞的调节机制、代谢控制发酵 基本思想及微生物代谢控制发酵措施 重点 反馈反馈抑制与反馈阻遏、反馈调 节的解除 难点 反馈反馈抑制与反馈阻遏 学时 3 一.酶活性的调节机制 1、反馈抑制概念 反馈抑制：在一长系列生物合成反应中，其代谢产物抑制途径中一个关键酶的活力的现象。 2、反馈抑制理论： A：受反馈抑制的调节酶是变构酶，酶活力的调控实质就是变构酶的变构调节。 B：变构酶有与底物结合的活性中心和与终产物结合的调节中心（变构部位）。 C：终产物与调节中心结合之后改变了酶的构象，从而影响了底物与活性中心的结合。 D：终产物与调节中心的结合是可逆的，终产物浓度降低，终产物与酶结合随即解离，酶又恢复原有构象。 3、变构酶模型 A：协调模型（莫诺德模型） a.变构酶一般是具有多亚基四级结构的蛋白。亚基中有活性中心和调节中心。 b.变构酶存在两种构象状态，R状态和T状态，两种状态间可逆平衡。 c.底物、激活剂、抑制剂可使R T平衡移动。 d.变构蛋白有对称性。酶状态改变对称性不变。 B：顺序模型（科什兰模型） 5、调节类型 5.1：单功能途径中酶活性的调节类型 Ⅰ 终产物抑制 5.2：多功能途径中酶活性的调节类 Ⅰ 具有复数效应部位的酶 A 多价反馈抑制(协作反馈抑制) B 合作反馈抑制 C 积累反馈抑制 D终产物抑制的补偿性回复 Ⅱ 顺序反馈抑制 Ⅲ具有专一性效应物的复数酶 二 酶合成的调节机制 1、? 反馈阻遏与诱导作用的概念 反馈阻遏：在微生物合成体系中，代谢产物抑制酶的生物合成。 诱导作用：在微生物合成体系中，代谢产物诱导酶的生物合成。 2、? 反馈阻遏和诱导作用理论（操纵子学说） A 操纵子由细胞的操纵基因和结构基因组成。 B 结构基因能转录遗传信息，合成相应的mRNA，进而翻译合成特定的酶。 C 操纵基因能控制结构基因作用的发挥 D 调节基因能产生一种细胞质的阻遏物，该阻遏物与酶促反应阻遏物（通常是终产物）结合时结构改变。和操纵基因的亲和力变大，使有关的结构基因不能合成mRNA，使酶的合成受到阻遏。 E 诱导物也能和细胞质阻遏物结合，使其结构改变，减少与操纵基因的亲和力，使操纵基因恢复自由，进而使结构基因进行转录，合成相应的mRNA，进而翻译合成特定的酶。 3、? 调节类型 A 单功能生物合成途径 B 多功能生物合成途径 Ⅰ单功能生物合成途径 A 简单的终产物阻遏 B 受阻遏酶产物的诱导作用 三 反馈抑制和反馈阻遏的比较 第二节：代谢控制发酵的基本思想 代谢控制发酵能否成功，目的产物能否大量积累，起决于微生物细胞自我调节机制能否解除. 解除微生物细胞自我调节机制的措施一般有： ★ 应用营养缺陷型菌株 ★ 选育抗反馈调节的突变菌株 ★ 选育细胞膜通透性的突变菌株 ★ 应用营养缺陷型回复突变菌株或条件突变菌株 ★ 应用遗传工程技术，创造工程菌株 一.切断支路代谢 切断支路代谢可通过选育营养缺陷型突变菌株或渗漏缺陷型突变菌株来达到 1．营养缺陷型突变菌株的应用 营养缺陷型突变菌株是指原菌株由于基因发生突变，致使合成途径中某一步骤发生缺陷，丧失了合成某些物质的能力，必须添加该物质才能生长的突变菌株。 2．渗漏缺陷型突变菌株的应用 渗漏缺陷型是指遗传性障碍不完全的缺陷型。渗漏缺陷型菌株的某种酶活性下降而不完全丧失，可少量合成代谢终产物，但不能合成过量的代谢终产物。 二. 解除菌体自身的反馈调节 1．选育抗类似物的突变株 类似物指的是代谢终产物的类似物，抗类似物突变株又叫代谢拮抗物抗性突变株。 代谢拮抗物与代谢终产物结构相似。也能与阻遏蛋白结合，且其结合是不可逆的也就是有关酶不能合成，如果突变株具代谢拮抗物抗性，那它就解除了反馈调节机制。 2．酶特性的利用 利用某种酶具有底物专一性宽的特性，用该酶对其他底物的活性，育得代谢调节突变株 3．营养缺陷型回复突变菌株的应用 某营养缺陷型突变菌株经回复突变，在回复其愿有的形状 三.增加前体物的合成 通过选育某些营养缺陷型突变菌株或结构类似物抗性突变菌株及克隆某些关键酶的方法，增加目的产物的前体物的合成，有利于目的产物的积累。 1．在分支合成途径中，切断除目的产物外的其他合成途径，增加目的产物的前体物的合成，使目的产物产量提高。 2．目的产物的生物合成从别的终产物开始时，设法解除目的产物合成的反馈调节和前体物合成的反馈调节。 四.去除终产物 改变细胞