第四章 细胞质膜分析.pptVIP

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第四章 细胞质膜分析

* * * * * * * * * * * * * * * 红细胞膜上ABO抗原,还有另一类血型抗原叫MN抗原,即红细胞膜上的血型糖蛋白A。它在SOS凝胶电泳谱上显示两条区带,即PAS-1和PAS-2,血型糖蛋白A是两者的二聚物。已知血型糖蛋白A由131个氨基酸组成,其一级结构已测定(图2)。血型糖蛋白A的肽链呈三节式结构,中间第73~92号氨基酸为疏水性肽链,可横穿膜脂层;N端肽链位于膜外侧,与血型活性有关,在这段肽链上分布有15条O-糖苷键型糖链和1条N-糖苷键型糖链,糖链中唾液酸占红细胞膜上全部唾液酸的一半以上;C端肽链位于膜内侧,含较多酸性氨基酸。 MN抗原由M抗原和N抗原两部分组成,如果用神经氨酸酶将M抗原切去1个唾液酸(N-乙酰神经氨酸),则为N抗原,如再切去一个唾液酸则抗原性完全失去。MN抗原的抗原性还和肽链上的氨基有关,若将氨基用乙酰基保护后即失去抗原性。 Rh阴性血又叫熊猫血,是指Rh阴型血,非常稀有的血型,因为极其罕见,被称为“熊猫血”。Rh阴性血是Rh阴性血型的俗称,人类红细胞血型由多达二十多种的血型系统组成,ABO和Rh血型是与人类输血关系最为密切的两个血型系统。当一个人的红细胞上存在一种D血型物质(抗原)时,则称为Rh阳性,用Rh(+)表示;当缺乏D抗原时即为Rh阴性,用Rh(-)表示。Rh(-)的分布因种族不同而差异很大,在白种人中的比例较高,约百分之十五 * * 磷脂在人红细胞质膜上分布的示意图 在外小叶中多者:SM:鞘磷脂 PC : 卵磷脂 在内小叶中多者:PE :脑磷脂 PS : 磷脂酰丝氨酸 PI :磷脂酰肌醇 无偏重者:CI :胆固醇 * (三)、膜蛋白的不对称性 同一种膜蛋白在脂双层中的分布具有特定的方向或拓扑学特征 糖蛋白的糖基位于质膜的 ES 面 各种生物膜的特征和功能主要是由膜蛋白来决定的,是生物膜完成复杂的在时间与空间上有序的各种生理功能的保证。 * 人的 ABO 血型抗原寡糖链结构的比较 * 四、细胞质膜的基本功能(*) 为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境 选择性的物质运输 提供细胞识别位点,并完成细胞内外信息跨膜传导。 为多种酶提供结合位点 介导细胞与细胞、细胞与胞外基质之间的连接 参与形成细胞表面特化结构 膜蛋白的异常常与某些遗传病、癌、自身免疫病甚至是将退行性疾病相关,很多膜蛋白可作治疗的药物靶标。 脂筏和胞膜窖具有特殊功能 * 第三节 细胞表面的分化 细胞表面的特化结构如:细胞外被、膜骨架、鞭毛和纤毛、微绒毛及细胞的变形足等等,分别与细胞形态的维持、细胞运动、细胞的物质交换等功能有关。 * 一、细胞外被 动物细胞表面的一层富含糖类物质的结构,称为细胞外被或糖萼。用重金属染料,如钌红染色后,在电镜下可显示厚约 10~20 nm 的结构,边界不甚明确。 作用:保护,细胞通信,并与细胞表面的抗原性有关。 – 红细胞质膜上的糖鞘脂是 ABO 血型系统的血型抗原,糖链结构基本相同,只是糖链末端的糖基有所不同。A 型血的糖链末端为 N-乙酰半乳糖;B 型血为半乳糖;O 型血则缺少这两种糖基。 * 二、 膜骨架 质膜下纤维蛋白组成的网架结构;位于质膜下约 0.2 μm 厚的溶胶层。 主要作用:维持质膜的形态。 模式材料:红细胞,经低渗处理破裂释放出内容物,留下一个保持原形的空壳,称为血影(ghost)(*)。 * (一)、膜骨架 (二)、红细胞的生物学特性 (三)、红细胞的质膜蛋白及膜骨架 * (一)、膜骨架(*) 膜骨架是指质膜下与膜蛋白相连的纤维蛋白网架,参与维持质膜的形状并协助质膜完成多种生理功能。 * (二)、红细胞的生物学特性 血影是指红细胞(既无细胞核又无内膜系统)经低渗处理,释放出血红蛋白和胞内其它可溶性蛋白后,留下的仍保持原来基本形状和大小的红细胞结构。 血影是研究质膜结构及其与膜骨架关系的理想材料。 * 经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,血影成分主要有: 血影蛋白:由结构相似的 α 链、β 链组成异二聚体,两个二聚体头与头相接连形成四聚体。 锚蛋白(ankyrin):与血影蛋白和带 3 蛋白的胞质部相连,将血影蛋白网络连接到质膜上。 带 3 蛋白:阴离子载体,通过交换 Cl-,使 HCO 3 - 进入红细胞。为二聚体,每个单体跨膜 12 次。 血型糖蛋白:单次跨膜糖蛋白,功能尚不明确,与 MN 血型有关,与带 4.1 蛋白相连。 * 红细胞膜骨架的构成: 血影蛋白四聚体游离端与短肌动蛋白纤维(约 13~15 单体)相连,形成血影蛋白网络。通过两个锚定点固定在质膜下方: 通过带 4.1 蛋白与血型糖蛋白连结; 通过锚蛋白与带 3 蛋白相

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