氨基酸代谢控制调节.pptVIP

氨基酸 第1节?氨基酸发酵机制(p113) 一、谷氨酸族氨基酸(谷氨酸glutamic acid、瓜氨酸citrulline、鸟氨酸ornithine、精氨酸argenine) 二、天冬氨酸族（赖氨酸lysine、苏氨酸threonine、蛋氨酸methionine） 三、分支链氨基酸族（缬氨酸valine、亮氨酸leucine、异亮氨酸isoleucine） 四、芳香族（色氨酸tryptophane、苯丙氨酸phenylalanine、酪氨酸tyrosine） 谷氨酸族 一、谷氨酸族氨基酸(谷氨酸glutamic acid、瓜氨酸citrulline、鸟氨酸ornithine、精氨酸argenine)发酵机制。 谷氨酸发酵机制 1）优先合成； 2）生物素缺陷； 3）alpha－酮戊二酸脱氢酶活力丧失或微弱； ４）ＣＯ２固定强； ５）谷氨酸脱氢酶活力强。 谷氨酸优先天冬氨酸合成 鸟氨酸、瓜氨酸、精氨酸合成 鸟氨酸发酵机制 在谷氨酸棒杆菌、黄色短杆菌、枯草芽孢菌中： 选育瓜氨酸缺陷型，鸟氨酸转氨甲酰酶活力缺失;?解除arg 的反馈抑制，切断向下的进一步代谢。 选育精氨酸结构类似物抗性突变株：如抗ＡrgHx, D-Arg。 ?解除arg 的反馈抑制 瓜氨酸发酵机制 在谷氨酸棒杆菌、黄色短杆菌、枯草芽孢菌中： 选育精氨酸缺陷型，琥珀酸合成活力酶失;?解除arg 的反馈抑制，切断向下的进一步代谢。 选育精氨酸结构类似物抗性突变株：如抗ＡrgHx, D-Arg。 ?解除arg 的反馈抑制 精氨酸发酵机制 只能选育精氨酸结构类似物抗性突变株：如抗ＡrgHx, D-Arg。 ?解除arg 的反馈抑制 天冬氨酸族 二、天冬氨酸族（赖氨酸lysine、苏氨酸threonine、蛋氨酸methionine）发酵机制 天冬氨酸发酵机制 大肠杆菌中天冬氨酸族生物合成的代谢调节fig 3-30 谷氨酸棒杆菌、黄色短杆菌等中的中天冬氨酸族生物合成的代谢调节fig 3-31 优先合成：MetThrLys 代谢互锁：二氢吡啶二羧酸合成酶受亮氨酸的反馈阻遏 平衡合成：天冬氨酸与乙酰CoA形成平衡合成fig3-32 平衡合成 赖氨酸发酵机制fig3-33 切断支路?选育Ｈom-突变株； 解除赖氨酸与苏氨酸对ＡＫ酶的协同反馈抑制?选育抗赖氨酸结构类似物（如LysHx,AEC)和抗苏氨赖氨酸结构类似物（如ThrHx,AHV)等突变株； 增加前体物的生物合成?选育丙氨酸缺陷型，抗天冬氨酸结构类似物突变株； 解除代谢互锁?选育Leu-,抗亮氨酸结构类似物突变株； 苏氨酸发酵机制fig3-34 切断支路?选育Ｍet,Lys,Ile缺陷突变株； 解除调节 苏氨酸对关键酶高丝氨酸脱氢酶反馈调节?选育抗苏氨酸结构类似物如ThrHx,AHV)等突变株； 解除赖氨酸与苏氨酸对ＡＫ酶的协同反馈抑制?选育抗赖氨酸结构类似物（如LysHx,AEC) ； 增加前体物的生物合成?选育丙氨酸缺陷型，抗天冬氨酸结构类似物突变株； 蛋氨酸发酵机制fig3-35 切断支路?选育Ｍet,Thr缺陷突变株； 解除调节 解除蛋氨酸的自身反馈调节? ： 选育抗蛋氨酸结构类似物（如乙硫氨酸、硒代蛋氨酸等）突变株 选育ＳＡＭ结构类似物抗性突变株； 除赖氨酸与苏氨酸对ＡＫ酶的协同反馈抑制?选育抗 AHV和 AEC突变株； 切断向下代谢?选育ＳＡＭ缺陷型突变株； 增加前体物的生物合成?选育丙氨酸缺陷型，抗天冬氨酸结构类似物突变株； 分支链氨基酸族 三、分支链氨基酸族（缬氨酸valine、亮氨酸leucine、异亮氨酸isoleucine）发酵机制 生物合成代谢调节机制fig3-37 异亮氨酸发酵机制fig3-37 异亮氨酸发酵是添加前体，绕过反馈调节的典型例子。 前体物：Ｄ－苏氨酸，alpha－溴丁酸、 alpha－氨基丁酸等。 要控制培养基中缬氨酸及葡萄糖亚适量，否则抑制产物的积累，而副产alpha－氨基丁酸。 选育缬氨酸结构类似物抗性突变株，解除对乙酰羟基酸合成酶的调节。 选育异亮氨酸结构类似物抗性突变株，解除对Ｌ－苏氨酸脱氨酶的反馈抑制。 若以葡萄糖为原料，则如何？ 缬氨酸发酵机制fig3-37 关键酶： alpha－乙酰乳酸合成酶，是变构酶，以TPP,Mg2+,FAS,Fe2+为辅基； 切断支路：选育Ile+Leu缺陷型突变株； 解除Ile,Val 合成酶系的反馈阻遏； 解除Val对alpha－乙酰乳酸合成酶反馈抑制； 可能的遗传标记：ile-+leu-+alpha-ABR(氨基丁酸)+2-TAR(2-噻唑丙氨酸)＋CMR 亮氨酸发酵机制fig3-37 简要分析 芳香族 四、芳香族（色氨酸tryptophane、苯丙氨酸phenylalanine、酪氨酸tyrosine）发酵机制 合成途径fig3-3