细胞膜的通透性观察,小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察资料.pptVIP

细胞生物学与遗传学教研室 遵义医学院 课前安排 一、相关理论：教材P59第七章第一节、第二节 二、实验分组 两人一组，一套实验器械，一只小白鼠 三、检查实验器械 每组实验器械包含： 解剖剪1把、解剖镊1把、注射器及针头1副、弯盘1个、试管架1个、玻璃离心管3支、滴管1支。 （请各组同学课前仔细清点及检查，若有缺失或损坏及时请老师补充） 第三次实验 Ⅰ 细胞膜的通透性观察 Ⅱ 小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察 Ⅰ 细胞膜的通透性观察 通过实验观察，来理解和掌握细胞膜对不同性质、 不同大小的物质的通透性。 [实验目的] [实验原理] 将红细胞悬液滴加到数种等渗溶液中，由于红细胞膜对各种溶质的通透性不同，有的溶质被允许进入，有的溶质不能进入；当溶质进入时，红细胞内渗透压增高，水分子随即进入细胞，引起溶血，借以判断是否选择透过。 由于溶质进入速度互不相同，溶血时间也不相同，借以判断细胞膜对物质的通透能力的大小。 细胞膜是否选择透过某物质需要通过溶血与否观察。 [实验用品] 0.17mol/L 氯化铵 0.17mol/L 氯化钠 0.17mol/L 硫酸钠 0.17mol/L 草酸铵 0.17mol/L 硝酸钠 0.32mol/L葡萄糖 0.32mol/L甘油 0.32mol/L乙醇 [操作流程] 1.观察10％兔红细胞悬液； 2.观察溶血现象： 取一支离心管加入0.5 ml兔红细胞悬液，再加入4.5 ml蒸馏水混匀，观察溶液颜色变化，并留做对照； 3.观察兔红细胞膜对不同溶质的通透性。 兔红细胞悬液 0.5 ml 氯化铵 氯化钠 硫酸钠 草酸铵 硝酸钠 甘 油 葡 萄 糖 乙 醇 4.5 ml 混匀，观察是否溶血 （10 min为限） 观察是否发生溶血，以秒为单位，以10 min为限 观察记录不同溶质的溶血时间，并记录在表中 两人一组，一人观察，一人记录 溶 质 是否引起溶血 溶血时间 分 析 氯化铵 氯化钠 硫酸钠 草酸胺 硝酸钠 甘 油 乙 醇 葡萄糖 [注意事项] 1.两人一组，一人观察，一人记录,10min 为限； 两人3支离心管，1支对照，2支用于观察某种 溶质的通透性，请亲自操作、思考并做记录； 2.观察完一种溶质后，将试管洗净，并尽量控干水分； 3.滴管不能混用。 Ⅱ 小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察 [实验目的] 1.了解巨噬细胞的吞噬活动。 2.通过实验观察，理解细胞膜物质转运的特点。 [实验原理] 在机体内，当巨噬细胞(macrophage)接触到病原体等异物时，可伸出伪足将其包围并吞入细胞，形成吞噬泡，进而与初级溶酶体融合，将异物消化分解。 现有实验条件下，如何才能观察到吞噬作用？ 大量巨噬细胞 被吞入的异种细胞 实验动物 淀粉肉汤（含台盼蓝） 鸡红细胞 小白鼠 [实验用品] 淀粉肉汤(含台盼蓝） 1％鸡RBC悬液 生理盐水 诱生巨噬细胞 腹腔注射淀粉肉汤(含台盼蓝) 1ml/次/天(3天) 腹腔注射1％鸡RBC悬液0.5～1ml 轻揉小鼠腹部，放置30 min [操作流程] （已完成） 取腹腔液 镜检 剖开小鼠腹腔 腹腔滴入生理盐水 0.5～1ml 颈椎脱臼法 处死小鼠 滴片 （少许） 盖片 生物绘图 结果观察并分析 [注意事项] 小白鼠腹腔注射要点； 颈椎脱臼法要点； 滴片时腹腔液不宜过多，少许； 剖开腹腔时尽量避免剪破血管； 两人一组，每组1只小白鼠. [结果观察] [作业] 1.请将“细胞膜的通透性观察”实验结果填入表中，并分析。 2.请绘制不同阶段巨噬细胞吞噬鸡红细胞图（吸附、正在吞噬、完全吞入三个阶段）。 [小结] 评价本次实验的得失 本次实验需要巩固的概念 膜的通透性 膜的流动性 膜的转运物质的特点 本次实验需要掌握的实验技能 腹腔注射 颈椎脱臼处死法 正确的显微镜检方法 生物学绘图方法 1. 完成实验报告； 2. 将动物尸体送到实验室门口动物尸体篓； 3. 清洗并检查自己桌面上的器材（弯盘、镊子等是否齐全）； 4. 做好显微镜使用登记和维护，盖好防尘罩； 5. 将用过的载玻片刷洗干净后放入回收盆中; 6. 盖玻片、吸水纸等扔到垃圾桶中。 （弃入水槽中会引起下水道堵塞） 镜检后作业与工作 值日生工作： 1、检查显微镜 2、清点检查器材 3、清洁公共实验区、打扫卫生 4、送交动物尸体 5、检查水电门窗安全