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玉米手册第三章 1.简介和概述 1.1基因的本质 1.2遗传变异 1.3生化遗传学 1.4基因抑制力的可控因素的本质和机制 2.玉米基因克隆的较早时期 很久以前DNA重组技术就被发明了，玉米遗传学是一门响亮的、令人激动的科学，通过细胞遗传学，基因图谱和杂种优势理论作为支撑。基因可以理解为染色体上最基本的功能单位。作为遗传物质基础的DNA的概念的整合和中心法则被玉米遗传学纳入思考范围，这门学科发展十分迅速。但是，过去繁衍玉米DNA的唯一方法是种植种子。 1.简介和概述 玉米遗传学的几个方面涉及到的内容与基因“越来越近”。 DNA序列水平上对基因进行功能分析的能力在那时还没有进入可能性研究范围。 一些亟待解决的的问题加速了重组DNA工具应用到玉米遗传学领域 .主要包括： 1.1基因的本质 孟德尔的遗传法则——分离规律很清楚地阐明了等位基因是如何分离的. 基因内重组的证据变得直观就是因为大肠杆菌T4噬菌体(Benzer 1955)。但这看起来似乎违背了孟德尔的第一条遗传规律-分离规律。 Nelson (1968)探索了大量丢失功能的隐性的waxy基因，他发现,waxy基因的表达可以在花粉细胞中被追踪到——使成千上万的减数分裂产物的快速检测成为可能。 Nelson还发现，像T4噬菌体，重组可以发生在植物waxy基因的非等位基因. 相似的工作也在果蝇中展开，并且，基因内重组也可以被观察到。 Nelson在他的1968年发表的论文中得出结论： 要理解有waxy位点的一些突变体的本质，基本上不同类型的分析是有必要的。 1.2遗传变异 几项研究表明，一些酶的活性可以用电泳的分离检测到。因此，不用冗繁的纯化过程酶的亚基可以很快地分离。在一些最早报道的同工酶的研究中，包含玉米植株不同组织中酯酶的研究涉及到了酯酶的活性(Schwartz 1960A, 1962, 1963, 1967)。 初始的研究揭示了酯酶活性的多带现象。 这到底是由一个单基因位点的多个等位基因引起的，还是多位点引起的？ 验证性实验惊奇的发现，一个差异带是杂合子专有的。过去认为，根据带的强弱判断的话, 在植物（2N）和胚乳（3N）组织中，酶是一个包含单位点编码的亚基的二聚物。混合酶由某个基因的两个等位基因编码的亚基组成。 Schwartz曾经通过一系列酯酶等位基因的区别来推断酶的重要特征。 ADH1和ADH2这两个基因，编码一个二聚体酶。两个基因编码的亚基可以使激活的酶类形成二聚体。 在玉米中，两个基因各自的对应的等位基因有相当的多形态，并且，这种变化在揭示酶的很多特征方面很重要。 例如，ADH1的一个等位基因，术语叫做Cm,指导一个低活性的同源二聚体的合成；此同源二聚体相当的稳定。稳定性取决于Cm指导合成的那个亚基。 一个非常有趣的观察就是，当ADH1酶的活性水平在两个等位基因都纯合的植物花粉中难以区分的话，使用杂合子作为样本，只一个等位基因表现高水平的活性。更进一步，在花粉提取物中，杂带缺失了—— “竞争模式” 在减数分裂两个等位基因分离之前，两个等位基因竞争一个限制因子。一个等位基因是一个较强的竞争者，解释了杂合子中对碘氧基苯甲醚的高活性水平。基因表达之前，竞争就发生了，阐明了基因表达的等位基因特异性的先编程。 任何一个纯合亲本中都没有发现只有杂合子特有的杂合酶，这与用杂种优势和具体的“超显性”理论(Schwartz, and Laughner 1969)的观点类似。 1.3生化遗传学 伴随着突变体的发现，一个中心的问题是生化损伤的破译。这些实验通常从对突变体进行某种形式的化学分析开始，然后直接到一个特定的研究方法。或者，突变特自身的表型也可以是一种方法。例如，缺失紫色或者黄色色素的突变体代表了相应的花青素和类胡萝卜素的改变。褶皱突变体反映淀粉的合成途径，opaque突变体直接扮演了存储蛋白的反映者。 研究的第二个阶段通常涉及到已知的酶学实验步骤，目的是找到在突变体中丢失了或者大大减少的酶，这些方法还不成熟。 例如，如果不侵入胚乳，很容易把 waxy突变体（淀粉合成酶）与opaque突变体(玉米蛋白合成)搞混。即使那时正确的代谢途径刚刚被确定，当时不是所有的酶学步骤是已知的，并且，即使这些酶学步骤已知了，一些实验过程还是漏洞百出的。 一旦一个基因与酶联系