微生物学_08微生物遗传论述.ppt

本章思考题 1.请说明下列二株不同遗传表型的大肠杆菌是否都是营养缺陷型?并作解释。 E.coli(His-)和E.coli(Lac-) 2.根据你所学的关于诱发突变的知识，你认为能否找到一种仅对某一基因具有特异性诱变作用的化学诱变剂?为什么? 3.请设计一个实验来决定在一种特定的细菌中发生的遗传转移过程是转化、转导还是接合? 说明每一种的预期结果。设想有下列条件和材料可以利用：(1)合适的突变株和选择培养基；(2)DNase(一种降解裸露 DNA分子的酶)；(3)二种滤板：一种能够持留细菌和细菌病毒，但不能持留游离的DNA分子；另一种滤板只能持留细菌；(4)一种可以插入滤板使其分隔成二个空间的玻璃容器。 RII菌落 噬菌体感染实验 研究者：A.D.Hershey和M.Chase(1952) 材料: E. Coli 方法: 同位素标记32P-DNA或35S-蛋白 步骤: 质粒DNA琼脂糖凝胶电泳图谱 M：1kb marker 1,2,3: plasmid 从上而下分别为同种质粒的三种不同构象。OC: 开环状DNA L: 线状DNA SC: 超螺旋状DNA。 1 M 2 3 原核生物质粒的接合 F质粒是能独立增殖的环状DNA分子。图示。 ?????????????????????????????? F质粒的结构： (1)原点， 转移的起点 (2)致育基因：形成性伞毛的基因群 (3)DNA复制酶基因 (4)插入序列（insertion sequence， IS） F质粒转移的过程： 1. 通过性菌毛使F+与F－紧密相连； 2. 质粒的转移、复制。 ?????????????????????????????????????????????????????? F+×F－的特点： (1)F质粒转移的频率高，1/10，使F-→F+。 (2)而染色体转移频率低。10-7 。 (3)F+×F+不发生接合。 因此，F+品系又称为低频重组品系（low frequency recombination） 高频重组品系Hfr Cavalli（1951）和Hayes（1954）先后从能育的A品系中分离出两个新的品系，它们和B（F-）杂交，出现重组频率很高。比AF+×BF-高出1000倍。这种品系称为高频重组品系Hfr（high frequency recombination）。 Hfr 的特点 ： (1)高频重组，染色体转移频率高， ×1000 (2)F质粒转移频率低 F－→F＋很少或没有。 Hfr和F+的联系和区别 联系：（1）都是雄性菌，含有F质粒 ???? 区别： （1）前者高频重组，后者低频重组； （2）前者F质粒转移频率低，后者F质粒转移频率高 （3）前者F质粒整合，后者F质粒游离 接合性质粒：能通过接合方式转移的质粒称为接合性质粒，F质粒、R质粒、Col质粒和毒力质粒。 二、细菌的转导 转导：由病毒介导的细胞间进行遗传交换的一种方式。分为两种类型： 普遍性转导：噬菌体可以转导给体染色体的任何部分到受体细胞中； 局限性转导：噬菌体总是携带同样的片段到受体细胞中。 普遍性转导 1952年Zinder和Lederberg在验证鼠伤寒沙门氏菌是否也存在接合现象时发现了转导现象. 所用菌株： 沙门氏菌LT22A（P22噬菌体）； 非溶原性细菌； 结果：发现在给体菌和受体菌不接触的情况下，同样出现了原养型细菌 转导的原理 噬菌体的包装机制： P22 DNA经环化和滚环复制形成一个多联体分子； DNA的包装是从基因组的特殊位点（pac）开始，用噬菌体编码的酶对多联体分子按顺序进行切割，并包装进P22外壳； 错误包装：用以切割的酶也识别染色体DNA上类似pac的位点，进行切割、包装。 普遍性转导模型 S.typhimuriun 野生型+供体菌，营养缺陷型－受体菌，P22媒介 P22增殖供DNA断裂 P22包装10－6－10－8误包 裂解 裂解物（少量），大量受体菌混合 外源DNA进入受体菌 同源区段配对，双交换整合到受体DNA上 遗传性状稳定转导子 局限性转导 局限性转导：部分缺陷温和噬菌体的少数特定基因携带到受体菌中，并获得表达的转导现象。 与普遍性转导的区别： ① 被转导的基因与噬菌体DNA共价相连，一起进行复制包装以及被导入受体细胞中。 ②局限性转导携带特定的染色体片段或基因，将其导入宿主细胞。 代表：λ噬菌体。 整合的λ原噬菌体从细菌染色体上不准确地切割时，便可形成局限性转导颗粒。 细菌的遗传转化 定义：同源或异源的游离DNA分子被自然或人工的感受态细胞摄取，并得到表达的水平方向的基因转移过程。 转化