“同病异治”复方对戊四氮慢性点燃大鼠脑区兴奋性和海马区谷氨酸代谢通路的影响.pdf

“同病异治复方对戊四氮慢性点燃大鼠脑 区兴奋性及海马区谷氨酸代谢通路的影响 硕士研究生：于云红 指导老师：谢炜教授 摘要 一、研究背景 癫痫是一组由大脑神经元反复异常同步化放电所引起的短暂中枢神经系统 功能失常为特征的慢性脑部疾病。1997年WHO统计报告，癫痫的患病率在发 达国家、经济转轨国家、发展中国家和不发达国家分别为5．O％o、6．1960、7．2％0、 调查表明：我国癫痫患病率为7．0％0，活动性癫痫患病率为4．6％0，以此推算， 全国约有活动性癫痫患者500600万。 临床常用的抗癫痫药如苯妥英钠、丙戊酸钠、卡马西平、乙虎胺等一直是 治疗癫痫的主要药物，但其药代动力学的局限性、致畸的可能性、对骨密度的 影响、以及对认知功能产生的不良作用等因素，影响了治疗的依从性，另外尚 有20％左右的顽固性癫痫药物难以控制，对手术治疗、物理治疗和心理治疗均 耐受，这就需要研发新的抗癫痫药物。中医药治疗癫痫历史久远，疗效确切， 副作用较少，有一定的优势，多种经方、验方临床疗效可观。 癫痫的发作类型多，发病机制十分复杂，而借助实验动物建立能够模拟人 类癫痫发作的实验动物癫痫模型，探讨癫痫的发病机制已成为当前本领域研究 的热点之一。PTZ慢性点燃模型是国际公认的癫痫模型之一，该模型是强直阵 挛发作的代表模型，可用于研究药物的效应，较为客观地反映药物的抗癫痫作 用。 中文摘要 神经元兴奋性增高和过度同步化电发放是产生癫痫的基本条件，癫痫发生 的机制之一可能与枢神经系统内抑制性氨基酸能神经元的兴奋性下降、兴奋性 氨基酸能神经元的兴奋性升高有关，脑内兴奋性神经递质过度积聚能导致神经 天门冬氨酸(Asparticacid，Asp)是脑内兴奋性氨基酸类神经递质，与癫痫的发 生发展密切相关。大脑的能量代谢与脑的各处功能活动有着密切的关系，癫痫 灶局部大脑葡萄糖代谢相对发作间期均呈明显相对高代谢。 Glu是中枢神经系统内最主要的兴奋性神经递质，突触间隙内Glu过度聚 集会导致神经元兴奋性增加及神经毒性，是癫痫发作的机制之一，并且癫痫发 作过程中局部Glu继续积聚将进一步加重神经系统的毒性损害。谷氨酸转运体．1 (Glutamate 隙内90％的Glu摄入局部胶质细胞，起着谷氨酸泵的作用，摄入到胶质细胞内 的Glu经谷氨酰胺合成酶(glutamine 经元，在神经元内谷氨酰胺酶的作用下转化为Glu，参与其再循环。 “同病异治”是中医辨证论治的特色之一，癫痫属于中医“痫病”范畴， 其辨证论治亦存在不同的治法，根据病因病机，中医论治癫痫涉及“从痰论治’’ 和“从肝论治’’等治法，为了探讨两种治法复方对同一类癫痫发作的作用特点 及机制是否存在差异，本研究选用大鼠PTZ慢性点燃模型，用“从痰论治癫 痫的复方定痫丸以及“从肝论治’’癫痫的复方柴胡疏肝汤进行干预，观察并比 较了两种复方作用下大鼠的痫性发作情况，及其对癫痫大鼠皮层、海马(不同 脑区)葡萄糖代谢水平、兴奋性氨基酸类神经递质水平及海马区Glu代谢通路 的影响，探讨两种治法复方的抗癫痫作用及机制是否存在差异。 二、方法与内容 1．PTZ慢性点燃大鼠模型的建立 腹腔注射1次，空白组大鼠每日腹腔注射等体积生理盐水，连续注射21天。按 II 硕士学位论文 照Racine癫痫发作分级标准，评价其痫性发作级别，选取在18±3天内至少连 续3次达4级或4级以上发作的大鼠，间歇l周后再次以相同剂量PTZ腹腔注 射，痫性发作仍能达到4级或4级以上的大鼠被认为是点燃成功大鼠。 2．两复方对PTZ慢性点燃大鼠痫性发作及脑电图的影响 点燃成功的大鼠60只，随机分为6组，分别为生理盐水组(A组；生理盐 组；定痫丸水煎液129／kg·d灌胃)、柴胡疏肝汤高剂量组(D组；柴胡疏肝汤水 煎液109／kg·d灌胃)、柴胡疏肝汤中剂量组(E组；柴胡疏肝汤水煎液59／kg·d 灌胃)及柴胡疏肝汤低剂量组(F组；柴胡疏肝汤水煎液2．59／kg·d灌胃)，各组 腹腔注射1次，观察大鼠痫性发作情况，按照Racine分级标准观察并比较各组 大鼠阵发性痉挛潜伏期(即从注射PTZ开始至3级发作的时间)、痫性发作级 别，并计算各组