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miRNA-30d 通过自噬调控影响未分化型甲状腺癌细胞对顺铂治疗敏感性的研究 中文摘要 中文摘要 目的：研究 miR-30d 对未分化型甲状腺癌（ATC ）细胞顺铂治疗敏感性的影 响，并探讨其内在分子机制。 方法：利用miR-30d mimic 使miR-30d 低表达的ATC 细胞过表达miR-30d， 采用细胞生物学、分子生物学、药理学和动物实验学等多种方法研究：1）miR-30d 对细胞自噬的影响及其内在调控机制；2 ） 在体外（细胞水平）和体内（动物水 平）研究miR-30d 介导的自噬激活对化疗药物顺铂治疗敏感性的影响。 结果： 本研究发现：1）萤光素报告基因分析证实beclin 1 的3’-UTR 存在与 miR-30d 相结合序列，并可负性调控beclin 1 （一个自噬相关基因）的表达。转染 miR-30d mimic 后，beclin 1 的萤光素报告基因活性、mRNA 及蛋白水平均显著降 低；2 ）miR-30d 可抑制顺铂诱导的自噬激活，表现为自噬相关蛋白 LC3 II （microtubule-associated protein 1light chain ） 水平下调、GFP-LC3 荧光颗粒数减 少；3 ）miR-30d 过表达可增强ATC 细胞对顺铂的敏感性，表现为细胞活力减弱、 凋亡细胞数增加，以及凋亡相关蛋白cleaved PARP 和cleaved Caspase 3 蛋白表达 上调；4 ）过表达beclin 1 能部分逆转miR-30d 引起的自噬水平下调及凋亡增加， 表现为转染beclin 1 质粒后，LC3 II 水平上调，cleaved PARP 和cleaved Caspase 3 蛋白表达下调以及细胞凋亡数减少；5 ）在接种ATC 细胞移植瘤模型裸鼠体内，增 加 miR-30d 表达能够增强顺铂的抑癌效应，表现为肿瘤体积减小、凋亡细胞数增 加、细胞增殖能力减弱。 结论： miR-30d可通过负性调控beclin 1 的表达抑制自噬激活，并增强ATC细 胞对化疗药物顺铂的敏感性。以上这些发现有助于我们进一步了解miR-30d在肿瘤 发生发展中的作用，并为肿瘤的预防和治疗提供了一个可能的潜在靶点。 关键词：未分化型甲状腺癌；miR-30d ；自噬；凋亡；beclin 1 ；顺铂； 研 究 生：杨伟琼 指导老师：杨金铭 教授 张熠 副教授 I 英文摘要 miRNA-30d 通过自噬调控影响未分化型甲状腺癌细胞对顺铂治疗敏感性的研究 Regulation of Autophagy by miR-30d Impacts Sensitivity of Anaplastic Thyroid Carcinoma to Cisplatin Abstract Objective: To study the effects of miR-30d on sensitivity of Anaplastic Thyroid Carcinoma cells to cisplatin, and the involved molecular mechanism. Methods: miR-30d has been observed to be significantly down-regulated in human anaplastic thyroid carcinoma (ATC), and is believed to be an im