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- 2017-05-10 发布于湖北
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绪 论 一、组织学与胚胎学的研究内容 组织学(histology):研究机体微细结构 及其相关功能的科 学。 胚胎学(embryology):研究人体发生、 生长及其发育机 制的一门科学。 胚胎学研究内容: 受精卵 组织学研究内容: 细胞 细胞间质 组织 上皮组织 结缔组织 肌肉组织 神经组织 器官和系统 人体 胚 胎 儿 (2~8周) (9~38周) 问题 解决方法 观察对象太小 放大 显微镜 观察对象无色,无反差 染色(HE染色) 观察对象生化成分不同 细胞化学、免疫组织化学 观察对象是活体 培养 二、组织胚胎学研究技术 一、普通光学显微镜(conventional light microscope,CLM) 1.标本的制作 a 石蜡切片技术 基本过程: 取材、固定—脱水及透明—浸蜡—包埋—切片—染色—脱水、透明—胶封 5~7um厚度 b 其它的标本制作方法 冰冻切片,涂片,铺片,磨片。 2.染色 HE染色:苏木精(Hematoxylin) 伊红(Eosin)染色 碱性染料 将嗜碱性物质(本身酸性)染成蓝色 酸性染料 将嗜酸性物质(本身碱性)染成红色 细胞核中的DNA、RNA细胞质中的RNA 细胞质、膜性结构(线粒体、溶酶体、滑面内质网) 涂片 2、电子显微镜(electron microscope, EM)技术 透射电镜(transmission electron microscope): 观察细胞内部结构 扫描电镜(scanning electron microscope): 观察组织或细胞表面的立体结构 细胞膜 细胞核 细胞质 卵细胞 神经细胞 血细胞 1.透射电镜技术(transmission electron microscope TEM) a. 标本制作 50~100nm的超薄切片 b.染色 重金属盐染色 c. 超微结构 d.电子密度高、低 二、电子显微镜 电子密度高: 当电子束投射到密度大吸附重金属多的结构时, 电子被散射的多, 因此, 射落到荧 光屏上的电子少而呈暗像, 电镜照片呈黑或深灰色, 称为电子密度高。反之称为电子密度低。 观察C内部更细微的结构, 即超微结构。 2.扫描电镜技术(SEM) a. 标本制作 不需制作超薄切片 b.染色 重金属盐染色 c. 超微结构 用于观察组织细胞表面结构,具有真实的立体感。 观察组织C的表面立体结构。 其它的显微镜技术 3.荧光显微镜技术(fluorescence microscope) 4.激光共聚焦扫描电镜技术(CLSM) (conforcal laser scanning microcope)
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