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- 2017-06-06 发布于天津
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第四章酶学基本知识和技术
第四章 酶学基本知识和技术
酶是活细胞产生的,并能在体内外起催化作用的一类特殊蛋白质。酶定量测定越来越多的应用与临床,而且在诊断、鉴别诊断上起着重要作用。
第一节 酶活性测定的基本知识
在临床生化检验中,测定酶活力的方法,通常有两种:
1.在一定条件下,单位时间内,被酶作用的底物减少量或产物生成量。
2.在一定条件下,酶活力与反应所需时间成反比的关系。
一、酶活性的概念和单位
(一)酶活性的概念
在规定条件下,单位时间内底物的减少量或产物的生成量,即酶的活性。如果将酶反应中S或P对t作图,可得到酶反应时间进程曲线图。
在线性期S和P的变化量与时间呈线性关系:
V===K
一般情况下,产物的减少量和产物的增加量是一致的,但测定产物的生成比测定底物的减少好。
因为反应体系中底物往往过剩,而产物是从无到有的,只要方法灵敏,测定的准确度可以很高。所以,酶活性测定大多采用产物生成法。
(二)酶活性单位
是指在某特定条件下,使酶反应达到某一速度所需的酶量。有三种表示方法:
1.惯用单位:
大多是由方法的作者自己规定,在某一特定的条件下,生成一定量产物为一个单位。
所以不同的酶,甚至同一个酶,不同的测定可有不同的定义。如ALT测定,改良穆氏法、金氏法、赖氏法的单位定义各不一样。所以无可比性。
2.国际单位:
1964年国际生化协会所规定的国际单位(IU):即规定实验条件下,每分钟能催化1微摩尔底
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