中药化学生物碱3精讲.ppt

第6节 生物碱的提取与分离 总生物碱的提取 生物碱的分离 提取分离方法对生物碱结构的影响 1.总生物碱的提取（?） （1）生物碱盐－－水或酸水提取法 （2）生物碱盐、游离碱－－醇或酸性醇提取法 （3）游离碱－－有机溶剂提取法 （1）生物碱盐易溶于水 3、游离易溶于有机溶剂 （原料须碱化） 2.生物碱的分离（?） （1）不同类别生物碱的分离 （2）生物碱单体的分离 利用生物碱碱性差异分离 利用生物碱或生物碱盐溶解度差异分离 利用生物碱特殊官能团分离 利用色谱法分离 （1）不同类别生物碱的分离 原理：按生物碱的碱性及是否含有酚羟基分类。 氯仿液 （弱碱性生物碱） 酸水液 （强，中强碱性生物碱） （2）生物碱单体的分离 利用生物碱碱性差异分离 利用生物碱或生物碱盐溶解度差异分离 利用生物碱特殊官能团分离 利用色谱法分离 利用碱性差异分离（pH梯度萃取法） 利用溶解度差异分离 利用特殊官能团分离 含酚－OH的生物碱在碱性条件下成盐溶于水，可与一般生物碱分离。如吗啡与可待因的分离。 含内酯或内酰胺结构的生物碱在碱性溶液中加热皂化开环生成溶于水的羧酸盐，而与其它生物碱分离，加酸后又环合成原生物碱而沉淀。如喜树碱。 吗啡和可待因混合物 利用色谱法分离 吸附柱色谱：应用广泛。吸附剂为硅胶、氧化铝，洗脱剂为以亲脂性溶剂为主的混合系统。如花椒根中6种生物碱的分离。 分配柱色谱：适用于极性较大的生物碱或结构相近的生物碱的分离。如高三尖杉酯碱与三尖杉酯碱的分离。 其他色谱法：干柱色谱、中压或低压柱色谱、制备薄层色谱、HPLC等。 3.提取分离方法对生物碱结构的影响 溶剂的影响 酸碱的影响 色谱分离的影响 其他影响 第7节 生物碱的色谱检识 理化检识 形态、颜色、气味等 　沉淀反应 　显色反应 色谱检识 薄层色谱 　纸色谱 　高效液相色谱 　气相色谱 1.薄层色谱 （1）吸附薄层 适用于分离和检识脂溶性生物碱。 吸附剂：硅胶、氧化铝。 展开剂：亲脂性溶剂为主。一般以氯仿为基本溶剂，根据色谱结果调整展开剂的极性。加入适量碱性溶剂，分离效果较好。 显色：有颜色的直接观察；有荧光的紫外下观察；多数用改良的碘化铋钾试剂显色（桔红色斑点）。 注意：Rf太小和复斑或拖尾时，可用碱液（0.1-0.5M NaOH）制板；或用碱性展开剂（少许二乙胺或氨水）；或在层析槽中放一盛有氨水的小器皿。 （2）分配薄层 　　 适用于极性较大或结构相近生物碱的分离。 支持剂：硅胶或纤维素粉。 固定相：甲酰胺（脂溶性生物碱） 　　　水（水溶性生物碱） 展开剂：对于脂溶性生物碱，用甲酰胺饱和的亲脂性有机溶剂为展开剂，如氯仿－苯。对于水溶性生物碱，以亲水性的溶剂为展开剂，如BAW（正丁醇-乙酸-水=4:1:5，上层）系统。 显色：同吸附薄层。 2.纸色谱 　　适用于水溶性生物碱、生物碱盐和亲脂性生物碱 的分离检识。 固定相：水、甲酰胺或酸性缓冲液。 展开剂：水做固定相，以亲水性的溶剂为展开剂，如BAW系统，适用于分离生物碱盐。以甲酰胺或酸性缓冲液为固定相的，多以亲脂性溶剂为主的展开系统，使用前用固定相饱和，适用于分离游离碱。 显色剂：同薄层法，含硫酸显色剂除外。 3.高效液相色谱 （1）吸附色谱 （2）分配色谱：正相色谱 　　　　　反相色谱 　　 　　固定相：弱碱性的键合相硅胶 　　流动相：偏碱性较好 黄连根的HPLC图 C：黄连碱 B：小檗碱 P：巴马丁 J：药根碱 M：木兰碱 流动相：水-乙腈-乙酸-三乙胺(80:20:0.3:0.8) 4.气相色谱 适用于挥发性化合物，或遇热不分解化合物 的分离。在生物碱检识中应用不多，如麻黄碱。 千金藤非酚性叔胺碱部分多缓冲纸色谱 * * 水或酸水提取法（盐酸 /硫酸/ 醋酸 /酒石酸） 浸渍 /渗漉/煎煮 酸水提取液（盐） 酸碱沉淀法a 离子交换树脂法 b 有机溶剂萃取法 c 总生物碱 中药酸水提取液（盐） 碱化、（盐析）、过滤 沉淀 水洗，干燥 总生物碱 a.酸碱沉淀法 盐酸小檗碱 (Berberine hydrochloride) 中药酸水提取液（盐） 通过阳离子交换树脂柱 流出液 （水性杂质） 树脂柱 氨液碱化（游离） 氯仿提取 回收溶剂 总生物碱 b.离子交换树脂法 一叶萩碱 (securinine) 中药酸水提取液（盐） 碱化（氨水、石灰水等） 碱水层 （水性杂质） 有机溶剂层 回收溶剂 总生物碱 c.有机溶液萃取法 游离生物碱 亲脂性溶剂萃取 醇（甲、乙）类溶剂提取法 渗漉/ 浸渍 /回流 醇提取液（盐 游离） 回收