消退素D1对大鼠脑缺血再灌注损伤后血脑屏障影响.pdf

摘要 消退素D1对大鼠脑缺血再灌注损伤后血脑屏障的 影响 研究生张景亮 导师马民玉 郑州大学第一附属医院麻醉科 河南郑州450052 摘要 背景 脑血管疾病因为较高的发病率和致残致死率给社会、家庭及个人造成了严 重的经济负担和精神负担，影响人们的生活质量，严重危害到人类的生命和健 康I¨。因此，寻找有效地治疗、预防脑血管疾病和最大程度地降低缺血性脑损伤 的药物及方法成为医学研究的重点方向。 而目前针对缺血性的脑血管疾病尚无有效的治疗方法。临床上采用早期的 溶栓治疗，同时会引起更为严重的脑缺血再灌注损伤【2】。研究发现，部分患者的 血管在脑缺血后能够经溶栓治疗后恢复再通或自然再通，但是在恢复血供后， 可导致恢复血流供应的脑组织在某一些情况下产生损伤和神经功能障碍加重， 即脑缺血再灌注损伤【31。其中研究证实血脑屏障通透性发生改变可导致脑组织出 血和水肿等继发性损伤。相关的研究表明：血脑屏障完整性在脑缺血再灌注损 伤的过程中的有重要的作用【4】。 血脑屏障由血一脑及血一脑脊液屏障组成，是脑毛细血管特有的特征性结构， 维持机体中枢神经系统内环境稳定，其结构的改变对神经系统有重要的影响。 在正常情况下，血脑屏障可以有效的保护脑组织免受许多化学物质和细菌的侵 害。在缺血性脑损伤后，血脑屏障的通透性增加，一些药物、病毒、中性粒细 胞和小吞噬细胞就可以通过血脑屏障【5j。血管基底膜由细胞外基质分子组成，对 维持血脑屏障的完整性起重要作用，而细胞外基质分子是基质金属蛋白酶的主 要作用底物。国内外研究显示，基质金属蛋白酶一2和基质金属蛋白酶一9可降解 摘要 细胞外基质、破坏血脑屏斟6|。 (EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)衍生来的具有抗炎、促炎症消退作用的内源 性脂质介质【J71。研究表明，DHA静脉注射或富含DHA、EPA饮食能减轻成年大 鼠和新生大鼠低氧／缺血诱发的神经功能损伤【8】。有研究发现∞-3不饱和脂肪酸 可以增加脑缺血后的血管生成，提供长期的脑保护[9】。消退素D1(resolvinD1， RvDl)是由DHA内生转化而来。已有许多研究发现RvDl对肝、肾、肺等器官的 o】【ll】【1 缺血再灌注损伤有保护作用【1 21。而目前对脑缺血再灌注损伤的影响，国内 外均未见报道。 本试验采用大鼠脑缺血再灌注损伤模型。观察消退素D1对大鼠局灶性脑缺 血再灌注损伤的影响，以及血脑屏障的通透性的变化，并探讨可能的机制。 材料和方法 分组 Dawl 选择清洁级健康Sprague 00只， ey雄性成年大鼠(体重260—2809)1 用完全随机数字表法将其分成五组：1．假手术组+溶剂组：Sham组(5u1)；2．脑缺 0．3nlVl，5u1)。 方法 1．通过改良线栓法，使大鼠右侧大脑中动脉短暂栓塞，制作局灶性脑缺血再灌 注损伤模型(MCAO模型)。使用10％水合氯醛(350mg／kg)给予大鼠腹腔注射麻 醉，从颈总动脉经颈内动脉置入线栓，并在2h后将线栓拔出，形成脑缺血再灌 注。在脑缺血再灌注24h后，进行大鼠神经功能损伤评分； 2．氯化三苯四氮唑(TTC)染色法检测大鼠脑梗死体积的变化； 3．干湿比法测定脑组织的含水量； 4．通过紫外分光光度计法检测大鼠脑组织中伊文斯蓝(evansblue，EB)的含量， 检测血脑屏障(blood-brain—barrier，BBB)的完整性； 5．用Westem Blot法检测基质金属蛋白酶-2(matrixmetalloproteinase一2， 摘要 IMP一2)和基质金属蛋白酶一9(matrix