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第三章 代谢控制发酵的基本技术 目的 掌握诱变、原生质融合、转化、转 导、杂交等代谢控制发酵的基本技术 内容 诱变、原生质融合、转化、转 导、杂 交 重点 诱变、原生质融合 难点 原生质融合、转化、转 导 学时 5 第一节：诱 变 一、诱变的概念和程序 诱变：就是利用物理或化学因素处理微生物细胞群体，使其中少数细胞的遗传物质的结构发生变化，从而引起微生物的遗传性状发生变化，然后通过目的选择标记设法从群体中筛选出少数性状优良的突变菌株的过程。 诱变程序： 出发菌株 纯化 制备菌体悬浮液 诱变剂处理 中间培养 目的突变菌株分离初筛 复筛 生产性试验 二、诱变剂 1．诱变剂的概念：能够显著地提高微生物突变频率的理化因素 2．诱变剂的种类：一般有下列两大类： 物理诱变剂：紫外线、X射线、r射线、快中子、激光、超声波等。 化学诱变剂：亚硝酸、烷化剂、羟胺、硫酸二乙酯（DES）、亚硝基胍（NTC） 、重氮化合物等 3．紫外线 诱变原理：DNA分子强烈吸收紫外线，可引起DNA的断裂、DNA分子内部和分子间的交联、核酸与蛋白质的交联、嘧啶水合作用及形成嘧啶二聚体等。 诱变方法： (1)在诱变处理前，开启紫外灯，预热20min，使光波稳定。 (2)将10m1细胞悬浮液