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为何要对发酵液进行预处理? 为何要进行预处理? 固液分离方法主要是过滤和离心。 对于细菌及某些放线菌,菌体细小,液体粘度大,不能直接过滤,若用高速离心,能耗很大,设备昂贵。若用膜分离技术(如微滤)易产生膜污染,通量降低。 发酵液中由于菌体自溶,核酸、蛋白质及其它有机粘性物质的存在也会影响固液分离。 因而寻找一种经济有效的方法来提高固液分离速度显得十分必要。 预处理的目的 预处理的目的:促进从悬浮液中分离固形物的速度,提高固液分离的效率: ⑴改变发酵液的物理性质,包括增大悬浮液中固体粒子的尺寸,降低液体黏度。 ⑵ 相对纯化,去除发酵液中的部分杂质(高价无机离子和杂蛋白质),以利于后续各步操作。 ⑶尽可能使产物转入便于后处理的一相中(多数是液相); 预处理的方法 加热法 Heating 凝聚和絮凝 Coagulation and flocculation 助滤剂Filter aids和反应剂 Reactant 二凝聚和絮凝 凝聚与絮凝处理过程就是将化学药剂预先投加到悬浮液中,改变细胞、菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态,破坏其稳定性,使其聚集起来,增大体积以便固液分离。 凝聚和絮凝技术常用于菌体细小而且黏度大的发酵液的预处理中。 凝聚和絮凝是两种方法,两个概念。 凝聚:指在投加的化学物质(铝、铁的盐类)作用下,胶体脱稳并使粒子相互聚集成1 mm 大小块状凝聚体的过程。 絮凝:指使用絮凝剂(天然的和合成的大分子量聚电解质)将胶体粒子交联成网,形成10mm大小絮凝团的过程。其中絮凝剂主要起架桥作用。 胶体双电层结构 发酵液中菌体表面带有负电荷,由于静电引力使溶液中反离子被吸附在其周围,在界面上形成了双电层。 正离子同时受到使它们均匀分布的热运动影响,具有离开胶粒表面的趋势。 胶体双电层结构 ζ电位的计算: δ— 扩散层的有效厚度 双电层与凝聚 由式(14-1)和式(14一2)可知,ζ电位与扩散层厚度δ和电动电荷密度q成正比,而扩散层厚度又与溶液中反离子强度和电荷成反比。 对带负电性菌体的发酵液,高价阳离子的存在,可压缩扩散层的厚度,促使ζ电位迅速降低,而且化合价越高,这种影响越显著。 凝聚价或凝聚值 在发酵液中加入具有高价阳离子的电解质,能脱除胶粒表面的水化膜,降低ζ电位,使双电层的排斥力减少,当不足以抗衡胶粒间的范德华引力时,由于热运动的结果导致胶粒的互相碰撞而聚集起来。 电解质的凝聚能力可用凝聚价或凝聚值来表示,使胶粒发生凝聚作用的最小电解质浓度(毫摩尔/升),称为凝聚价或凝聚值。 Schulze-Hardy法则:反离子的价数越高,凝聚价越小,即凝聚能力越强。 阳离子对带负电荷的胶粒凝聚能力受化合价、水化半径、离子运动能力的影响,次序为 高分子絮凝剂的吸附架桥作用 2)天然有机高分子絮凝剂 人工合成有机高分子絮凝剂虽然发展很快,但还存在着残留单体有毒,生物降解难等问题,所以其应用受到了限制。天然有机高分子絮凝剂具有无毒,易生物降解,原料来源广等优点。 天然有机高分子改性絮凝剂根据其原料来源不同可分为淀粉类、纤维素类、植物胶类和聚多糖类。 其中淀粉改性絮凝剂的研究开发最引人注目。 3)无机高分子聚合物 有聚合铁系和铝系两大类 铁系絮凝剂具有操作简单、费用低,受温度影响小,亲和力强,能有效地去除悬浮物、表面活性剂、破坏油水乳状液的能力很强等优点,缺点腐蚀性强、稳定性差。 铝系是目前应用广、工艺较成熟的一类无机金属盐絮凝剂,絮凝效果好,缺点具毒性等。 微生物絮凝剂 微生物絮凝剂是近年来研究和开发的新型絮凝剂, 一类由微生物或其分泌物产生的具有絮凝细胞功能的代谢产物。 包括直接利用微生物细胞的絮凝剂、利用微生物细胞壁代谢产物的絮凝剂和克隆技术所获得的絮凝剂 主要成分是糖蛋白、粘多糖、纤维素及核酸等高分子物质。 微生物絮凝剂和天然絮凝剂与化学合成的絮凝剂相比,最大的优点是安全,无毒和不污染环境。 絮凝的影响因素 发酵液的性质(细胞浓度,表面电荷); 絮凝剂的浓度,最佳用量为粒子表面积约有一 半被聚合物覆盖; 絮凝剂的分子量; pH 控制; 搅拌速度。 三 加入助滤剂(filter aids) 一种不可压缩的多孔微粒, 在发酵液中加入固体助滤剂,则菌体 可吸附于助滤剂微粒上,助滤剂就作为胶体粒子的载体,均匀地分布于滤饼层中,降低了滤饼的可压缩性,减小了过滤阻力。 目前生物工业中常用的助滤剂是硅藻土,其次是珍珠岩粉、活性炭、石英砂、石棉粉、纤维素、白土等。 助滤剂的选择 (1)粒度 根据悬浮液中的颗粒和滤液的澄清度确定,一般颗粒较小的滤饼应采用细小的助滤剂。 (2)助滤剂的品种 应根据过滤介质选择助滤剂品种。使用粗目滤网时易泄漏,可选择石棉粉、纤维素;采用细目滤布时,可使用细硅藻土; (3)用量 间歇操作时
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