第三章肠科杆菌方案.ppt

埃希菌属 沙门氏菌属 耶尔森菌属 根据生化、血清学试验、DNA同源性至少包括29个菌属，120个以上的菌种 。 是人和动物肠道内正常菌群。一般不致病。常被用作环境和食品卫生的检测指标。 在人和动物出生后数小时即进入肠道，并伴终身。当宿主免疫力下降或菌侵入肠外组织器官，可引起肠外感染。 一些特定血清型的菌株与人和动物的疾病密切相关。 其中，大肠埃希菌(E. coli) 最重要。 1, 大小为0.4-0.7×1-3μm。大多数菌株有周身鞭毛。有普通菌毛和性菌毛； 对碱性染料着色良好，菌体两端略深。 兼性厌氧 普通培养基上生长良好，最适37℃。 在营养琼脂上形成圆形突起、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落，直径2～3mm。 麦康凯琼脂上形成红色菌落、伊红美蓝上产生黑色带金属闪光的菌落、SS琼脂上一般不生长。 能发酵葡萄糖等多种糖类，产酸产气。 大部分菌株迅速发酵乳糖； 吲哚、甲基红试验阳性. IMViC试验为“+、+、-、-”。即为典型大肠杆菌。 V-P试验 靛基质（Indole）试验 三糖铁（TSI）琼脂试验 2－志贺氏菌　　3－沙门氏菌　　4－大肠杆菌 抗原主要有O、K、H三种。是血清型鉴定的基础。 O抗原170种、H 抗原56种、K抗原在100种以上。 根据耐热性不同K抗原又分为L、A、B三型。一个菌株只含有一个型别的K抗原。 大肠杆菌的血清型表示方法可用O:K:H排列，如O111：K58(B4)：H2 ⑴ O 抗原（菌体抗原） 存在于所有革兰氏阴性菌细胞壁脂多糖层。耐热，100℃不被破坏。不同菌种的O抗原特异性取决于脂多糖分子末端重复结构多糖链的糖残基种类和排列。 具有种属特异性。 存在于鞭毛蛋白。不耐热，60℃30分钟即被破坏。 H抗原的特异性取决于多肽链氨基酸排列顺序和空间结构。 细菌失去鞭毛后，运动随之消失，同时菌体抗原外露，即为H-O变异。 位于O抗原外围，能阻抑O凝集现象。多糖性质，60℃30分钟可去除。 如大肠杆菌K抗原。 伤寒杆菌的 Vi抗原。 化学组成为蛋白质，能干扰O凝集现象。 煮沸可以破坏菌毛。 存在于肠道杆菌的表面，为氨基糖聚合物. 根据致病性大肠杆菌的不同毒力特性和致病机理可将其分为5个病原性类型. (一)产肠毒素大肠杆菌 (Enterotoxigenic E.coli, ETEC) 致人和初生幼畜水样腹泻。致病力与粘附性菌毛和产生肠毒素有关。 ETEC： 在体内或体外生长时产生的并能分泌到胞外的一种毒素，对动物或人的肠有毒性作用。根据对热的耐受性不同分为： ⑴ 不耐热肠毒素 (Heat-labile enterotoxin, LT) ⑵ 耐热肠毒素 (Heat-stable enterotoxin, ST) 不耐热肠毒素 (Heat-labile enterotoxin, LT) LT-Ⅰ先以其B亚单位与小肠上皮细胞上的神经节苷脂受体牢固结合，并形成通道，毒素的A亚单位经此通道进入细胞内，活化胞内腺苷酸环化酶，导致cAMP 浓度急剧上升，使肠细胞分泌机能亢进，溢出，因而造成水和电解质大量积蓄于肠管。 临床上水样腹泻和迅速脱水的症状。 100℃加热10-30分钟不失活 ST 的毒性作用与激活小肠上皮细胞鸟苷酸环化酶，导致胞内cGMP增多，从而引起肠内水盐代谢不平衡。 ST无免疫原性。 引起婴幼儿腹泻的重要病原菌，常限于几种特异的血清型。不侵袭肠细胞，也不产生经典的LT和ST，菌体紧密粘附于肠上皮细胞表面或嵌入肠上皮细胞膜形成的一种杯状凹陷并引起局部肠绒毛的萎缩或消失。 EPEC的致病力与毒力因子、粘附因子及Vero细胞毒素有关。 能引起出血性结肠炎，还与人的溶血性尿毒综合征有关。 近几年发现的一类致腹泻的大肠杆菌。 粘附素菌毛是ETEC一类特有的菌毛，其上含有的大量能识别相应宿主小肠上皮细胞受体的亚单位蛋白质分子通常称作粘附素(adhesin) 。 粘附素有K88(F4)、K99(F5)、 987P(F6)、F41、F42及F17（FY或Att25）, 1、形态和培养特性 麦康凯琼脂上形成红色菌落，在伊红美蓝琼脂上为中心暗蓝黑色并有金属闪光的菌落。 2、生化鉴定 接种TSI琼脂（发酵乳糖或蔗糖使斜面和底层变黄，不发酵乳糖或蔗糖，仅发酵葡萄糖时，底层变黄，斜面变红）。 常规的生化项目鉴定。