第十四章蛋白质生物合成方案.pptVIP

第十二章 蛋白质生物合成 (4学时) 学习要求 （1）理解蛋白质合成体系的重要组分；蛋白质的合成过程。 （2）了解蛋白质合成后的运送。 （一）核糖体是装配蛋白质的机器 tRNA的活化 即氨基酰-tRNA 合成酶催化tRNA与特定氨基酸结合 氨基酸+ATP+tRNA+H2O ?? 氨基酰-tRNA + AMP + PPi 每一种氨基酸至少有一种对应的氨基酰-tRNA 合成酶。它既催化氨基酸与ATP的作用, 也催化氨基酰基转移到tRNA。 氨基酰-tRNA 合成酶具有高度的专一性。 每一种氨基酰-tRNA 合成酶只能识别一种相应的tRNA。 tRNA 分子能接受相应的氨基酸, 决定于它特有的碱基顺序, 而这种碱基顺序能够被氨基酰-tRNA 合成酶所识别。 蛋白质因子 三、蛋白质合成步骤 三、蛋白质合成步骤 肽链合成的起始 肽链合成的延伸 肽链合成的终止与释放 合成多肽的输送和加工 蛋白质分子的折叠和分子伴侣 （一）肽链合成的起始 决定甲硫氨酸和决定缬氨酸的密码子就是起译密码子，即AUG和GUG 起始密码的识别：核糖体小亚基上的16S rRNA和mRNA的SD序列（位于起始位点上游4－13个富含嘌呤碱基的核苷酸）结合 N－甲酰甲硫氨酸－tRNA的活化形成起始复合物（E.coli） N－甲酰甲硫氨酸－tRNA (fmet- tRNA) 、mRNA、30S亚基三者结合时还需要三种蛋白质因子(IF1、IF2、IF3）和提供能量的GTP参与。 一旦70S核糖体－mRNA-fmet-tRNA复合体形成，则fmet-tRNA 占据P位，空出A位准备接受一个氨酰tRNA ，起始即告完成。 （二）肽链合成的延伸 结合（或称进位） 对应于mRNA上第二个密码子的氨基酰-tRNA（aa- tRNA）进入A位与核糖体结合，这是一个需能的反应， GTP是直接能源。此外还需要两个蛋白质因子Tu和Ts。 Ts、Tu和前面提到的移位酶G统称为肽链延伸因子。 （二）肽链合成的延伸 转肽 结合过程一旦完成立即进行转肽。通过肽基转移酶的催化使P位上的fmet- tRNA（肽基－tRNA）转到A位上的aa-tRNA的游离氨基上，形成肽键，并释放出原来在P位上的tRNA。这个反应不需能量。肽基转移酶是50S核糖体亚基上的一个蛋白质组分。 （二）肽链合成的延伸 移位 核糖体从mRNA的5‘向3’方向移动一个三联体的距 离，于是携带着肽基的tRNA连同mRNA从核糖体的A位 移到P位：这个过程称为移位，由移位酶（或称G因 子）催化，并须有供能的GTP参与。G因子具有GTP 酶活力，能催化GTP分解放出能量。由于核糖体的移 动，原来在A位上的肽基一tRNA已经移到P位，于是 第三个密码于进入A位，等待着第三个aa-tRNA进入。 （三）肽链合成的终止释放 （四）合成肽链的输送和加工 多肽输送信号由新合成多肽N端的信号肽所控制， 而真核细胞中，识别信号肽的机构是一个称为信 号识别体的核蛋白体（SRP）来完成。它具有识别信 号肽，并与核糖体相结合暂停新生肽延伸的功能。 一旦刚合成的多肽找到安全去向（越膜）后，SRP就 脱离核糖体，暂停的肽链就可以继续完成合成过程 （四）合成肽链的输送和加工 许多刚合成好的多肽，并不是最终产物，须经 一系列加工过程，才能成为有功能的蛋白多肽。 Lasky于1978年首先提出分子伴侣（mulecular chaperone）的概念，这是一类在细胞内能帮助新生肽链正确折叠与装配组装成为成熟蛋白质，但其本身并不构成被介导的蛋白质组成部分的一类蛋白因子，在原核生物和真核生物中广泛存在。 作业: P289 3;7;8 识别mRNA的终止密码子，水解所合成肽链与tRNA间的酯键，释放肽链 R1识别UAA、UAG R2识别UAA、UGA R3影响肽链的释放速度 节首 合成肽链的输送： 节首 合成肽链的加工： 1、新生多肽N端氨基酸的除去(Met或fMet） 2、切除新生肽中不必需的肽段 3、蛋白质中二硫键的形成 4、多肽中氨基酸侧链的修饰 5、泛素化作用与不正常多肽的处理 节首 有的蛋白质，如循环系统的蛋白酶或一些功能蛋白等，其刚合成好的多肽，除切去信号肽外，还需切去过长的末端肽段或内部的连接肽等，才能成熟为有功能的蛋白质或酶蛋白。 2、切除新生肽中不必需的肽段 返回 3、蛋白质中二硫键的形成 在遗传密码中，人们尚未找到过胱氨酸的密码子，而不少蛋白质或酶却含有一个或若干个胱氨酸二硫键，这对形成特定的蛋白质空间结构十分必需。经研究分析，这是在蛋白质合成后，其空间位置相邻的两个一组半胱氨酸残基被氧化而生成二硫键。 返回 4、多肽