第十一章蛋白质的生物合成方案.ppt

第十一章蛋白质的生物合成 温州医学院生物化学教研室 李春洋 遗传信息贮存于DNA分子中，通过转录生成mRNA，由mRNA传递的遗传信息被蛋白质生物合成成为蛋白质的氨基酸排列顺序，因此蛋白质生物合成过程又称为翻译。 蛋白质生物合成过程中需要200多种生物大分子参加，其中最关键的是mRNA、tRNA、rRNA。 翻译包含起始、延长和终止三个阶段的连续过程。 蛋白质生物合成的多肽链，要经过翻译后的加工，多种蛋白质在胞液合成后还需要输送到适当部位发挥作用。 第一节参与蛋白质生物合成的物质 一、蛋白质生物合成需要的原料 氨基酸是蛋白质合成的原料，由mRNA编码的氨基酸只有20种，它们是蛋白质合成的直接原料。 蛋白质分子中含有的一些特殊氨基酸是在肽链合成后经修饰加工形成的。 二、三种RNA在翻译中所起的作用 （一）mRNA的作用 mRNA是结构基因的转录产物，含有DNA传递的遗传信息。 mRNA分子上以5＇→3＇方向，由AUG开始到3＇端终止密码子之间的核苷酸序列，称为一个开放阅读框架。 在阅读框架内，每3个连续的核苷酸组成一个三联体的遗传密码解读蛋白质中20种氨基酸，称为遗传密码子。 遗传密码的特点： 方向性——起始密码子总是位于开放阅读框架5＇端，终止密码子位于3＇-末端，且密码子的三个核苷酸也是按5＇→3＇方向阅读的。 连续性——阅读mRNA分子中遗传密码是从5＇端起始密码起始开始每3个核苷酸连续不断地向3＇端阅读，直至终止密码出现。 简并性——一个氨基酸具有两种或两种以上密码子（同义密码）的现象（除蛋氨酸和色氨酸外）。 摆动性——密码子和反密码子配对，有时会出现不遵循碱基配对规律的情况，称为遗传密码的摆动性。 通用性——是指所有生物体在蛋白质生物合成过程中使用的遗传密码相同。 （二）tRNA的作用 一种氨基酸可以和2～6种tRNA特异地结合，tRNA分子反密码环的反密码子与mNRA的密码子配对。 反密码子与密码子配对有时不严格遵守碱基配对原则，出现摆动配对。 （三）rRNA的作用 各种细胞核蛋白体都有大、小两个亚基构成，每个亚基都由多种rRNA和核蛋白质组成。 胞质中的核蛋白体分为两类：一类附着于粗面内质网；另一类游离于胞质。 核蛋白体小亚基上有mRNA结合的部位，使mRNA附着于核蛋白体上； 大亚基不仅有转肽酶活性，还有结合氨基酰的A位和结合肽酰的P位（在原核生物还有E位）。 三、蛋白质合成酶系 1.氨基酰-tRNA合成酶——在ATP存在时，催化生成氨基酰-tRNA，具有绝对专一性和校正活性； 2.转肽酶——位于核蛋白体大亚基（核酶），其作用是使大亚基P位上的肽酰基转移到A位上氨基酰基的氨基上生成肽键； 3.转位酶——其活性存在于EF-G，其作用是使核蛋白体向mRNA的3＇-端移动一个密码子的距离。 四、其他因子 其他蛋白质因子，如起始因子（IF/eIF）、延长因子（EF/eEF）、释放因子（RF/eRF）等； 无机离子，如Mg2+、K+等； 供能物质，如ATP、GTP等。 第二节蛋白质生物合成的过程 一、氨基酸的活化与转运 “L”形的tRNA具有两个功能端：一端是反密码子，能识别mRNA中的密码子并与它配对结合；另一端能与氨基酸共价结合。 tRNA携带的氨基酸是由氨基酰-tRNA合成酶催化的，该酶具有绝对专一性，能特异地识别氨基酸和tRNA，并利用ATP释放的能量完成氨基酰-tRNA的合成。 密码子AUG可编码蛋氨酸（Met），同时还是起始密码。 在蛋白质合成过程中特异识别mRNA上起始密码子AUG的tRNA称为起始tRNA，用tRNAi或者tRNAimet表示；在多肽链延伸过程中运载氨基酸的tRNA统称为普通tRNA ，用tRNA或者tRNAmet表示。 真核生物：Met-tRNAiMet 原核生物：fMet-tRNAifMet 二、原核生物蛋白质的合成 （一）肽链生物合成的起始 原核蛋白质生物合成起始是指大、小亚基、mRNA和具有启动作用的氨基酰-tRNA聚合为起始复合物的过程。 参与起始复合物形成的物质有核蛋白体大亚基、核蛋白体小亚基、mRNA、起始氨基酰（甲酰蛋氨酰）-tRNA和各种起始因子（IF或eIF）等。 原核生物翻译起始分为三个阶段： 核蛋白体亚基的拆离 30S前起始复合物的形成 70S起始复合物的形成 （二）肽链的形成与延长 肽链延长阶段是指根据mRNA密码序列的指导，依次添加氨基酸，从N端向C端延伸肽链，直到合成终止的过程。 原核和真核生物翻译延长过程基本相同，可分为进位、成肽和转位三个步骤，每循环一次延长一个氨基酸。 延长阶段需要的蛋白质因子称为延长因子（EF），还需要GTP、Mg2+和K+等参与。 （一）进位 根据A位上对应的mRNA遗传密码，相应的氨基酰-tRNA进入核蛋白体A位，称为