TK1检测项目指导手册课题.docx

胸苷激酶1（TK1）项目指导手册 胸苷激酶1（TK1）项目指导手册 ~  PAGE \* MERGEFORMAT 20 ~ ~  PAGE \* MERGEFORMAT 21 ~ 第一部分 项目运行意义概述 胸苷激酶1简称TK1，是一种国际公认的细胞增殖特异性标志物；它参与DNA补救合成途径,是DNA合成的特殊标志酶。临床上,可用于监测和评估体内细胞的异常增殖速度。 健康人细胞多处于静止状态（非增殖细胞），血清中的TK1酶含量极微，而随着增殖类疾病的发生，尤其是肿瘤、组织异常增生类疾病，细胞发生过度增殖，血清中TK1酶的含量出现显著升高，超过健康人平均水平2倍甚至100倍以上。所以，通过检测血清中TK1浓度水平的变化，能够敏感地发现细胞增殖异常，动态评估细胞增殖发展趋势，为提前干预治疗高风险癌前病变，遏制肿瘤进程提供重要信息。 在瑞典卡罗琳斯卡大学(诺贝尔医学和生理学奖评审机构)二十多年的研发基础上,华瑞同康生物技术（深圳）有限公司与瑞典Karolinska大学TK1研究团队共同研制出高灵敏度的胸苷激酶1（TK1）细胞周期分析试剂盒及CIS系列化学发光数字成像仪，该系统是世界上唯一用于临床检验血清中TK1浓度的产品，其特异性高于95%,对各类增殖性疾病的综合检测灵敏度高于70%。 该系统已在多临床领域得到较为广泛地应用： 1、独立的肿瘤预后因子：多国家，多机构的研究表明，TK1是优选的预后评估指标，可作为独立的肿瘤预后因子； 2、动态评估手术、放化疗效果：能够对各种实体肿瘤（例如：肺癌，胃癌，结肠癌，直肠癌，食道癌，乳腺癌，宫颈癌，前列腺癌等）以及白血病和淋巴癌患者的治疗效果进行评估，为治疗方案的改善提供参考； 3、更早评估肿瘤复发风险：对肿瘤康复期患者进行动态跟踪，较影像学更早提示肿瘤复发或转移风险信号； 4、评估各类增殖类疾病恶变风险：处于过度增殖的增殖类疾病是肿瘤形成的第一步。基于TK1与细胞增殖的密切关系，能够灵敏地通过TK1的浓度变化，发现恶性增殖风险，为肿瘤的癌前干预提供了更有效率，更有价值的信息，适用于无疾病人群的恶性增殖风险筛查。 第二部分 项目运行准备 ???.项目环境 环境参数 温度： 24-25℃； 湿度：小于65%； 实验用水： 双蒸水； 去离子水； 实验室设置要求： 项目最小占地约8-9平方米； 工作区域可放置两张1.5m×0.8m或一张3m×1m工作台； 控温设备：30立方米左右的独立空间，可选用2匹的挂式空调进行控温,或选用恒温摇床，如下图： 二、项目所需设备 1、实验用设备 编号设备名称规格要求数量用途1化学发光数字成像分析仪CIS系列1采集发光信号和分析数据2脱色/恒温摇床（平摇）20-100r/min可调1免疫孵育3台式离心机0-4000r/min1分离血清4冰箱冷藏2-8℃ 冷冻-20℃1保存试剂 保存样本5打印机USB数据接口1输出检测结果6恒温水浴锅单孔或双孔1控制反应液温度 2、实验工具及耗材 （1）实验用工具： 编号工具名称规格要求数量用途1移液器0-10μl或1血清点样2移液器20-100μl1配制反应液3移液器100-1000μl1分装和检测样本4试剂瓶500ml2配制工作液6烧杯100ml2配制工作液7电子计时器无1实验提醒8探头温度计-50℃-50℃1控制实验温度9塑料镊子平头1实验需要10反应盒24T、48T、96T各1适用于对应规格的产品使用11量筒25ml1配制工作液12量筒250ml1配制工作液实验耗材 编号耗材名称规格要求用量用途1移液器枪头20μl1个/样本配套0-10μl移液器使用2移液器枪头200μl2个/次配套20-100μl移液器使用3移液器枪头1ml1个/次配套100-1000μl移液器使用4分装管500μl或1ml1个/样本血清分装时使用5吸水纸无-保持环境清洁，防止膜污染6精密PH试纸5.5-9.0-测定缓冲液PH值 三、实验样本处理要求及保存 样本种类：血清 采集要求： 必须使用无任何添加剂的真空采血管； 取静脉血2ml（室温）； 建议空腹采血； 脂血、溶血样本可能造成实验结果的偏差，不建议使用； 样本处理： 采血完成后，室温下静置或37℃水浴至凝固后离心使用； 离心转速：4000r/min，离心