第5章发酵过程及控制解说.ppt

影响微生物需氧量的因素 1、菌种 2、菌体浓度 3、菌龄 4、培养基 (一)影响需氧和供氧的因素 影响供氧量的因素 1、搅拌 2、通气量 3、空气分布管的结构 4、发酵罐的液柱高度/直径比 5、培养液的物理性质 6、泡沫 溶解氧的控制： 应满足需氧≤供氧 （二）溶解氧的控制 需氧方面 控制最适的菌体浓度 供氧方面： 1、改变气体成份 2、提高搅拌速度 3、增加挡板 4、增加通气量 5、提高罐压 几个概念： 呼吸强度：指一克干菌体，在一小时内所需氧的毫摩尔数 摄氧量：指一升发酵液，在一小时内所需氧的毫摩尔数 通气量：指一分钟内，发酵液的体积比通过发酵液的空气体积 六、pH对发酵的影响及控制 (一)、pH值对发酵的影响： 1、pH影响酶的活性 2、pH影响微生物细胞膜的带电状况，从而影响微生物对养料的吸收和对代谢产物的分泌 3、pH影响培养基中某些营养物质的可给性 4、pH可能改变培养基的氧化还原电位 5、pH会影响某些微生物的形态 （二）、影响pH变化的因素： 1、菌种特性 2、培养基组成 3、发酵条件 (三)、pH在发酵过程中的变化规律 在发酵前期，菌体生长缓慢，糖分解的少，铵离子利用的也少，所以pH变化缓慢。 随菌的生长，菌分解了含氮有机物，释放出铵，培养基的pH会缓慢上升。 当菌转入对数生长期，由于菌体大量繁殖，大量利用糖和铵离子，培养基的pH逐渐下降。 在生长后期，由于菌体自溶，释放出铵，pH又回升。 1、调节培养基的配方 2、补料控制 ① 加酸、加碱 ② 流加无机氮源 ③ 加碳源物质 3、调节通气量 （四）、发酵过程中pH的调节 七、CO2对发酵的影响 CO2是微生物的代谢产物，同时它往往也是合成所需的一种基质 排气中CO2的浓度与细胞量有一定的联系，通过测定CO2的生成，可用来估算菌的生长速率和细胞量 溶解在发酵液中的CO2对氨基酸、抗生素等发酵具有抑制或刺激作用。 (一)、CO2 对菌体生长及 产物形成的影响 当排气中的CO2 浓度高于4％时，菌体碳水化合物的合成及呼吸速率下降 发酵液中的CO2浓度为1.6×10－2 mol时，会严重抑制酵母菌的生长 CO2 影响产黄青霉的形态 CO2 对氨基酸合成的影响 100 66 15 0 0 0 1 2 3 4 紫苏霉素相对产量 进气中CO2含量(％) CO2 对紫苏霉素生物合成的影响 (二)、排气中CO2 与菌体生长的关系 (三)、排气中CO2 与pH的关系 * 一、种子制备工艺及质量控制 二、常用代谢参数 三、基质浓度变化及控制 四、温度对发酵的影响及控制 五、溶解氧对发酵的影响及控制 六、pH对发酵的影响及控制 七、CO2对发酵的影响 八、泡沫的形成及控制 九、染菌分析及控制 第五节 发酵过程及控制 发酵是一个复杂的生物化学过程影响因素很多：菌种、培养基、温度、pH、溶氧、污染等。 一、种子制备工艺及质量控制 菌种是发酵的关键，从一个保存的菌种，到生产上使用的种子，如果按几十～几百吨的发酵规模，10％的种子量(接种量)计，需要几吨～几十吨的种子。 (一)、作为种子的要求： 1、细胞的生活力强，移种至发酵罐后能迅速生长 2、菌体总量及浓度能满足大容量发酵罐的要求 3、无杂菌污染 4、生理形状稳定、保持稳定的生产能力 (二)、种子制备的工艺流程及对发酵的影响 1、工艺流程 2、接种时间(种龄)和接种量 接种时间：对数生长期，菌体量还未达最高峰 接种量：决定于生产菌种在发酵罐中的繁殖速度 谷氨酸棒状杆菌：1％ 大多数抗生素发酵：5～10% 个别的发酵：20～25％ 接种量过小，除延长发酵周期外，往往还引起其它不正常情况 接种量过高，会使菌体生长过快，培养液粘度过高，造成供氧不足 3、种子质量检查与判断 ①检查pH ②检查培养基灭菌后糖、氮、磷等的含量 ③检查菌丝的形态、浓度、种子液外观等 ④无菌检查 ⑤稳定性检查 ⑥其它参数检查：某种酶的活性、产物量等 (三)、影响种子质量的因素： 1、原材料质量 2、培养温度、湿度、时间等 3、种子罐通气量 4、冷藏时间 5、传代次数 二、常用代谢参数 1、物理参数 ⑴、温度 ⑵、罐压 ⑶、搅拌速度 ⑷、空气流量 ⑸、表观粘度 ⑹、发酵液重量 2、化学参数 ⑴、基质浓度 ⑵、pH ⑶、产物浓度 ⑷、DNA量 ⑸、关键酶 ⑹、溶解氧 ⑺、排气中的氧含量 ⑻、排气中的CO2含量 3、生物参数 ⑴、菌丝形态 ⑵、菌丝干重或湿重 ⑶、菌体比生长速率 ⑷、氧的比消耗速率 ⑸