北大仪器紫外可见分光光度法1讲课.ppt

第四章 紫外－可见分光光度法 概述 分光光度法是以物质对光的选择性吸收为基础的分析方法。根据物质所吸收光的波长范围不同，分光光度法又有紫外、可见及红外分光光度法。 紫外-可见分光光度法 （Ultraviolet and visible spectrophotometry； UV-vis） 研究物质在紫外-可见光区（200-800 nm）分子吸收光谱的分析方法。属于电子光谱。 紫外-可见分光光度法的特点 1. 灵敏度高 可达10-4～10-6 g/ml，部分可达10-7 g/ml，所以它主要用于测定微量组分。 2. 应用广泛 几乎所有的无机离子和许多有机化合物可以用分光光度法进行测定。如土壤中的氮、磷以及植物灰、动物体液中各种微量元素的测定。 3. 操作简便、迅速、仪器设备不太复杂 若采用灵敏度高、选择性好的有机显色剂，并加入适当的掩蔽剂，一般不经过分离即可直接进行分光光度法测定，其准确度虽不及重量分析法和容量法，但对于微量组分的测定，结果还是满意的。 一、颜色的产生以及有机化合物的生色原理 二、电子跃迁类型 三、紫外-可见吸收光谱的常用概念 四、吸收带类型及其与分子结构的关系 五、影响吸收带的因素 六、朗伯-比尔定律 七、偏离比尔定律的因素 有色物质的不同颜色是由于吸收了不同波长的光所致。 溶液能选择性地吸收某些波长的光，而让其他波长的光透过，这时溶液呈现出透过光的颜色。透过光的颜色是溶液吸收光的互补色。 有色溶液对各种波长的光的吸收情况，常用光吸收曲线来描述。 将不同波长的单色光依次通过一定的有色溶液，分别测出对各种波长的光的吸收程度（用字母A表示）。以波长为横坐标，吸光程度为纵坐标作图，所得的曲线称为吸收曲线或吸收光谱曲线。 KMnO4的颜色及吸收光谱 分子吸收光谱的产生——由能级间的跃迁引起 能级：电子能级、振动能级、转动能级 二、紫外-可见吸收光谱的电子跃迁类型 电子跃迁类型 1.σ→ σ*跃迁： 饱和烃（甲烷，乙烷） E很高，λ150nm（远紫外区） 2. n → σ*跃迁： 含杂原子饱和基团（—OH，—NH2） E较大，λ200nm左右（真空紫外区） 3. π→ π*跃迁： 不饱和基团（—C＝C—，—C ＝ O ） E较小，λ~ 200nm左右 体系共轭，E更小，λ更大 4. n→ π*跃迁： 含杂原子不饱和基团（—C ≡N ，C＝ O ） E最小，λ 200~400nm（近紫外区） 按能量大小：σ→ σ* n → σ* π→ π* n→ π* 续前 注： 紫外光谱电子跃迁主要类型 ： n—π*跃迁 π—π*跃迁 饱和化合物无紫外吸收 电子跃迁类型与分子结构及存在基团有密切联系 根据分子结构→推测可能产生的电子跃迁类型； 根据吸收谱带波长和电子跃迁类型 →推测分子中可能存在的基团（分子结构鉴定） 图示 增色效应和减色效应 增色效应：吸收强度增强的效应 减色效应：吸收强度减小的效应 强带和弱带： εmax 105 → 强带 εmin 103 → 弱带 四、吸收带类型及其与分子结构关系 1．R带：由含杂原子的不饱和基团n →π*跃迁产生 C＝O；C＝N；—N＝N— E小，λmax 250~400nm，εmax100 溶剂极性↑，λmax↓ → 蓝移（短移） 2．K带：由共轭双键的π→ π*跃迁产生 (—CH＝CH—)n，—CH＝C—CO— 强带，λmax 200nm，共轭体系增长，λmax↑→红移 溶剂极性↑，对于—(—CH＝CH—)n— λmax不变 对于—CH＝C—CO— λmax↑→红移 3．B带：由π→ π*跃迁产生 芳香族化合物的主要特征吸收带 λ=230-270nm宽带，具有精细结构 极性溶剂中，或苯环连有取代基， 其精细结构消失 4．E带：由苯环环形共轭系统的 π→ π*跃迁产生 芳香族化合物的特征吸收带 E1 180nm 常观察不到 E2 200nm 强吸收 苯环有发色团取代且与苯环共轭时，E2带与K带合并，一起红移（长移） 溶剂对紫外吸收光谱的影响 溶剂极性的影响 对λmax影响：n-π*跃迁：溶剂极性↑，λmax↓蓝移；π-π