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微生物的独特生物学特性 (1) 个体的结构极其简单; (2) 营养体一般都是单倍体; (3) 易于在成分简单的组合培养基上大量生长繁殖; (4) 繁殖速度快; (5) 易于积累不同的中间代谢产物或终产物; (6) 菌落形态特征的可见性和多样性; (7) 环境条件对微生物群体中各个个体作用的直接性和均一性; (8) 易于形成营养缺陷型; (9) 各种微生物一般都有相应的病毒; (10) 存在多种处于进化过程中的原始有性生殖方式; 研究微生物遗传学的意义 微生物是研究现代遗传学和其它许多主要的生物学基本理论问题中最热衷的研究对象。 对微生物遗传规律的深入研究,不仅促进了现代分子生物学和生物工程学的发展,而且为育种工作提供了丰富的理论基础,促使育种工作从不自觉到自觉、从低效到高效、从随机到定向、从近缘杂交到远缘杂交的方向发展。 遗传与变异的概念 遗传和变异是生物体的最本质的属性之一。 遗传(heredity):亲代生物的性状在子代得到表现;亲代生物传递给子代一套实现与其相同形状的遗传信息。特点:具稳定性。 遗传型(genotype):又称基因型,指某一生物个体所含有的全部基因的总和;------是一种内在可能性或潜力。 遗传型 + 环境条件 表型 表型(phenotype):指生物体所具有的一切外表特征和内在特性的总和;------是一种现实存在,是具一定遗传型的生物在一定条件下所表现出的具体性状。 (2)细菌培养实验 ①加S菌DNA ②加S菌DNA及DNA酶以外的酶 ③加S菌的DNA和DNA酶 ④加S菌的RNA ⑤加S菌的蛋白质 ⑥加S菌的荚膜多糖 (二)噬菌体感染实验 A. D. Hershey和M. Chase, 1952年 (2)含35S-蛋白质的一组:放射性75%在上清液中 插入序列(IS,insertion sequence) 分子量最小(仅250-1600bp),只有引起转座的转座酶基因而不含其它基因,具有反向末端重复序列。已在染色体、F因子等质粒上发现IS序列。E . coli的F因子和核染色体组上有一些相同的IS,通过这些同源序列间的重组,就可使 F因子插入到E . coli的核染色体组上,形成Hfr菌株。IS被切离时引起的突变可以回复,如果因切离部位有误而带走IS以外的一部分DNA序列,就会在插入部位造成缺失,从而发生新的突变。 转座子(Tn,transposon) 转座子又称转位子或易位子分子量居中(一般为2-25kb)。除了与转座作用有关的基因外,还含有抗性基因(对抗生素、某些毒物)、乳糖发酵基因等几个至十几个基因。从结构来看, Tn 有两种类型,即末端为反向或顺向重复的IS,或末端为反向重复的序列。Tn虽能插到受体DNA分子的许多位点上,但并不完全是随机的,某些区域更易插入。(参见书上P215-216页) Mu噬菌体(即 mutator phage) Mu噬菌体即 诱变噬菌体是E . coli的一种温和噬菌体。含有噬菌体生长繁殖和转座所必需的基因,其分子量最大(39kb),含有20多个基因,但并没有固定的整合位置。Mu噬菌体引起的转座可以引起插入突变,其中约有2%是营养缺陷型突变。 转座的遗传效应 插入突变 产生染色体畸变(复制性转座子) 基因的移动和重排 2、基因突变的自发性和非对应性的证明 1)变量试验(fluctuation test) 实验设计者 美国的鲁里亚和德尔波留克根据统计学原理设计; 时间:1943年 实验材料: 对T1噬菌体敏感的大肠杆菌 实验目的 验证突变的性状与引起突变的原因间有无直接对应关系 实验过程 如果突变的性状与引起突变的原因间呈对应性结果如何? 1)变量试验(fluctuation test) 2)涂布试验(Newcombe experiment) 实验设计者 1949年纽康布 实验材料 对T1噬菌体敏感的大肠杆菌 采用固体平板培养 实验过程 3)平板影印试验(replica plating) 实验设计者 1952年,美国的莱德伯格夫妇 实验材料 E.coli K12 实验过程 影印实验(replica plating) 1952年,J. Lederberg夫妇的论文《平板影印培养法和细菌突变株的间接选择》,更好地证明了微生物的抗药性是在未接触药物前自发地产生的,这一突变与相应药物环境毫不相干。 平板影印培养法,是一种能达到在一系列培养皿的相同位置上出现相同遗传型菌落的接种培养方法:(1)把长有许多菌落的母种培养皿倒置于包有灭菌丝绒布的木质圆柱印章上,使其沾上来自平板上的菌落;(2)然后可把这一“印章”上的菌落一一接种到不同的选择性培养基平板上。待这
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