酶工程第二章xin精讲.pptVIP

第二章 酶的发酵生产（微生物发酵产酶） 为什么主要选用微生物作为酶生产的来源？ 第二章 酶的发酵生产（微生物发酵产酶） 为什么选用微生物作为酶生产的来源？ （1）种类多，易筛选到所需的产酶菌 （2）繁殖快 （3）易培养 （4）代谢能力强，产酶量高 第二节 常用的产酶微生物 常用的产酶微生物 概论与流程：微生物酶发酵生产的分类 各种规模的液体深层发酵罐 Laboratory Process DevelopmentFermentor Experiments Agitation Cooling and heating Air inlet and outlet pH control Nutrient addition Inoculation Viewing port 第三节 发酵工艺条件及控制 在酶的工业生产中，还要摸索一系列工程和工艺条件，如培养基的灭菌方式，种子培养条件，发酵罐的型式，通气条件，搅拌速度加温，冷却和pH等，还要研究酶的分离纯化技术和制剂工艺，这些条件的综合结果将决定酶生产本身的经济效益。 一、细胞活化与扩大培养： 性能优良的产酶细胞选育出来以后，必须尽可能保持其生长和产酶特性不变异、不死亡，不被杂菌污染等，就必须采取妥善的保藏方法，以便随时应用。 种子培养基中一般N源丰富些，碳源可相对少些，种子培养条件，包括温度、pH、溶解氧的供给等应尽量满足细胞生长的需要，以便使细胞 生长得既快又好。 在酶制剂生产中菌种的产酶性能虽然是决定发酵效果的重要因素，但是发酵的工艺条件对产酶的影响也是十分明显的。除培养基组分外，其它如pH、温度、通气、搅拌、泡沫、湿度、诱导剂和阻遏剂等，它们相互联系，只有配合恰当，才能得到良好的效果。 三、影响酶产生 的一些因素 1、各类微生物生长繁殖时对pH值要求不同。 2、细胞发酵产酶的最适pH值通常接近于该酶 反应的最适pH值。 3、此外，通过控制培养基的pH值，来改变细 胞所产生多种酶时各种酶之间的产量比例， 以满足人们的需要。 培养基的pH值在发酵过程中往往升高或降低这种变化与细胞特性有关，也与培养基组分密切相关。含糖量高的培养基，由于糖代谢产生有机酸，会使培养基的pH值向酸性方向移动；此时培养基中成分C/N值增高；相反地，含蛋白质、氨基酸较多的培养基，经代谢产生较多的胺类物质，使pH值向碱性方向移动；此时C/N比降低。 pH值还与通气的量，糖和脂肪的氧化有关，如果通氧不足，糖和脂肪氧化不完全，则会产生如有机酸类的中间产物，这样培养基的pH就出现不同程度降低，总之各种反应都影响pH的改变，由于各个时期内各种反应优势不同，发酵液的pH则相应地变动，根据pH的变动情况，常用作为发酵过程生产控制的依据之一。 5、pH值的调节可以通过调节培养基原始的pH，掌握原料的配比，保持一定的C/N比，或者添加缓冲剂，如发酵过程中加氨水，使发酵液具有一定缓冲能力，也可通过调节通气量来实现。 不同的细胞有不同的最适生长温度 同时培养基中的营养物质被合成为菌体的细胞物质和酶时的生化反应，都是吸热反应，以及热量不断扩散和散失又使培养基温度降低。几个因素综合结果，决定了培养基的温度。 培养液中溶解氧的量多少决定于在一定条件下氧气的溶解速度。 4、调节溶氧速率的方法： ②调节氧的分压： ③调节气液接触时间 ④调节气液接触面积： ⑤培养液的特性对溶氧速率有明显： 常用消泡剂有：天然油类、醇类、脂肪酸类、胺类、酰胺类、金属皂类、聚硅氧烷、醚类等，其中以聚二甲基硅氧烷为最理想的消泡剂。 第四节 酶发酵动力学 思考题: 1、何谓溶氧速率和耗氧速率？如何进行溶解氧的调控？ 2、试对酶的生物合成四种模式的特点进行比较？ 3、氧的溶解速度又称为溶氧速率或溶氧系数，以Kd表示（溶氧速率）。 Kd：在单位体积的发酵液在一定时间内所能溶解的氧的量，单位（mmol氧/L·h） 由于溶氧速率与通气量、氧的分压、气液接触时间、气液接触面积以及培养液的性质等有密切关系，因此可从这5个方面来调节。 ①调节通气量： （四）搅拌： 在上面提到可将气泡打碎，增加气液接触面积，加速溶氧速率。 （五）泡沫：泡沫是在酶发酵生产中，发酵液受到强烈的通气搅拌和培养基中某些成分变化及代谢中产生的气体所形成。且产生的气泡不易消失，这是由于培养基中蛋白质分子在气泡表面形成一层吸附膜，聚集成泡沫层。泡沫会阻碍CO2排除，直接影响氧的溶解，将影响微生物生长和产物的形成，必须消泡，消泡措施有：机械力消泡及消泡剂消泡 （六）提高酶产量的措施 1、优选菌种 2、添加诱导物： 3、控制阻遏物浓度： 4、添加表面活性剂 5、添加产酶促进剂 （一）菌种选育（一劳永逸） 1.诱