样品处理用黄曲霉毒素免疫亲和柱.docVIP

黄曲霉毒素免疫亲和柱 RIDA Aflatoxin Column 简介 RIDA 黄曲霉毒素免疫亲和柱（产品编号：R5001/R5002） 黄曲霉毒素免疫亲和柱为检测食品饲料中黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2 及M1含量的样品前处理用提取柱。 柱子特别适合处理较难提取的样品，如调味品，花生，干果，儿童食品（牛奶与谷物的混合物）。 R5001 含10支黄曲霉毒素免疫亲和柱 R5002 含50支黄曲霉毒素免疫亲和柱 凝胶悬浮物：琼脂糖（凝胶） 抗体： 单克隆抗体结合在 最大进样量： 60ml 流速： 1滴/秒 检测限：取决于进样体积及检测方法（草药，调味品及茶叶用ELISA方法检测，检测限大约为125ng/kg，ppt） 柱吸附能力： 大约100ng黄曲霉毒素B1 回收率： 约90% （用RIDASCREEN Aflatoxin B1试剂盒产品编号：R1201） 用途 RIDA 黄曲霉毒素免疫亲和柱适合于和酶免疫分析试剂盒（RIDASCREEN AflatoxinB1 及M1）或HPLC结合使用定量测定黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2 和M1。 用免疫亲和柱制备样品简化了样品提取过程并提高了样品的纯度。纯化了的样品可以用不同的分析方法测定。 测定原理 基本原理是抗原抗体反应。 柱子中含有连接单克隆抗体的凝胶悬浮物，抗体对黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2 和M1是特异的。 当样品通过柱子时，如果样品中有黄曲霉毒素存在，会结合到单克隆抗体上。 所有其它物质不会保留在柱子内。 用甲醇洗脱，黄曲霉毒素会从抗原抗体结合物中释放出来，甲醇引起抗体变性，所以抗原（黄曲霉毒素）是游离的并被洗脱出来。  提供的试剂 每个盒子中有10 或50 支免疫亲和柱子，样品可以分别处理。 需要的材料但盒中不提供 4．1 设备 ----天平 ----粉碎机 ----离心机 ----振荡器 ----磁力搅拌器 ----50ul 和100ul微量移液器 4．2 试剂 ----甲醇 ----吐温20 ----二氯甲烷 ----正庚烷 5．操作者应该注意之事项 ----黄曲霉毒素是致癌物质应特别小心，避免样品及提取物接触皮肤（戴手套）。 ----使用过的玻璃容器及黄曲霉毒素提取物最好用pH7的高氯酸溶液（10%V/V）浸泡过夜 ----不要使用过了有效日期的试剂盒。 6． 储存条件 ----RIDA 黄曲霉毒素免疫亲和柱保存于2-80C.不要冷冻 ----将不用的亲和柱放进原锡箔袋中重新密封并保存于2-80C 7．样品制备 样品应当存放在凉爽的地方避免光线照射。 黄曲霉毒素对光线敏感，因此样品及提取物应当避光存放。 按下面的提取过程，样品通过柱子的实际体积等于1g 原物质，取决于分析方法的检测限可以通过改变进柱的样品体积而改变。 7．1 谷物，饲料及花生 ----5g粉碎的样品与25ml甲醇70%溶液混合， ----用磁力搅拌器搅拌或振荡10分钟， ----用滤纸过滤， ----加15ml蒸流水到5ml滤液中混合， ----全部样品溶液过柱， 7．2 草药，调味品及茶叶 ----5g粉碎的样品与25ml甲醇70%溶液混合， ----用磁力搅拌器搅拌或振荡10分钟， ----用滤纸过滤， ----加15ml蒸流水到5ml滤液中混合， ----加0. 25ml吐温20并搅拌2分钟， ----全部样品溶液过柱， 7．3 牛奶样 -----10oC离心10分钟 3500 g, 去除脂肪（如果没有冷冻离心机，请预先冷却到10oC） ----离心后完全吸除上层的奶油层， ----10ml脱脂牛奶过柱。 7．4 奶粉 ----10g奶粉放入容量瓶中加入蒸馏水至100ml， ----搅拌5分钟溶解， -----10oC离心10分钟 3500 g, 去除脂肪（如果没有冷冻离心机，请预先冷却到10oC） ----离心后完全吸除上层的奶油层， ----10ml脱脂牛奶过柱。 8 用RIDA 黄曲霉毒素免疫亲和柱提取 8．1测定之前注意事项 8.1.1使用之前将所有试剂回升至室温.(20-24oC) 8.1.2将不用的亲和柱放进原锡箔袋中重新密封并保存于2-80C 注意： 8.2 过柱纯化样品 不要让柱子干燥！ 8.2.1用2ml 蒸馏水平衡柱子（冲洗） 8.2.2将约1ml步骤7所得到的提取液加入柱子中 8.2.3在柱子顶端接上合适的接口