核酸生物化学讲述.pptVIP

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第二章 核酸 核酸是一类重要的生物大分子,担负着生命信息的储存与传递。 核酸是现代生物化学、分子生物学的重要研究领域,是基因工程操作的核心分子。 第一节 核酸是遗传物质的载体 一、核酸的研究发现史 1868年,F. Miescher从细胞核中分离得到一种酸性物质,即现在被称为核酸的物质。 1944年,Avery的转换转化实验 1952年, Hexshey、Chase T2噬菌体(捣碎器实验) 1953年,Watson、Crick DNA双螺旋模型 核酶(Ribozyme) 第二节 核酸的基本化学组成 核苷酸(nucleotide) 核苷酸 戊糖+碱基+磷酸 核酸 多聚核苷酸是通过一个核苷酸的C3’-OH 与另一分子核苷酸的5’-磷酸基形成3’,5’-磷酸二酯键相连而成的链状聚合物。 第三节 DNA的结构 一、DNA的一级结构 脱氧核糖核酸的排列顺序 可以用碱基排列顺序表示 连接键:3’,5’-磷酸二酯键 磷酸与戊糖顺序相连形成主链骨架 碱基形成侧链 多核苷酸链均有5’-末端和3’-末端 DNA的碱基顺序本身就是遗传信息存储的分子形式。生物界物种的多样性即寓于DNA分子中四种核苷酸千变万化的不同排列组合之中。 二、DNA的三级结构 DNA双螺旋的进一步扭曲构成三级结构,负超螺旋 原核 双链环状DNA(dcDNA) 病毒 单链环状DNA(scDNA) 单链线性DNA(ssDNA) 三、rRNA * * 核酸概述 or and 可分离 二、生物遗传的中心法则 核酸 核苷酸 核苷 磷酸 碱基 戊糖 元素组成: C H O N P 核酸完全水解产生嘌呤和嘧啶等碱性物质、戊糖(核糖或脱氧核糖)和磷酸的混合物。核酸部分水解则产生核苷和核苷酸。每个核苷分子含一分子碱基和一分子戊糖,一分子核苷酸部分水解后除产生核苷外,还有一分子磷酸。核酸的各种水解产物可用层析或电泳等方法分离鉴定。 碱基 1. 嘌呤(Purine) 1 2 3 4 5 6 9 7 8 腺嘌呤Adenine A 鸟嘌呤guanine G 2. 嘧啶(Pyrimidine) 1 2 3 4 5 6 尿嘧啶 uracil U 胞嘧啶 cytosine C 胸腺嘧啶 thymine T 核酸中也存在一些不常见的稀有碱基。稀有碱基的种类很多,大部分是上述碱基的甲基化产物。 H H H H H H H H H AMP ADP ATP 5’ 5’ 3’ 3’ DNA的序列测定 双脱氧末端终止法(Sanger酶法) 2. Gilbert化学降解法 基因与基因组 基因(gene):一段有功能的DNA片段,生物细胞中DNA分子的最小功能单位(交换单位)。 蛋白质(mRNA 蛋白质) 产物 tRNA RNA rRNA 调节功能:调节基因 无产物 作用未知 结构基因 基因组(genome):某生物体(完整单倍体)所含全部遗传物质的总和。 包括:核基因组(拟核/核DNA)及核外(质粒/质体DNA) bp(碱基对) 103 104 105 106 107 108 109 1010 1011 1012 人 两栖类 鱼类 藻类 酵母 细菌 E.Coli 病毒 质粒 各种细胞、病毒和细菌质粒中基因组的大小 二、DNA的二级结构 DNA的双螺旋模型 1953年,J. Watson和F. Crick 在前人研究工作的基础上,根据DNA结晶的X-衍射图谱和分子模型,提出了著名的DNA双螺旋结构模型,并对模型的生物学意义作出了科学的解释和预测。 在DNA分子中,嘌呤碱基的总数与嘧啶碱基的总数相等。 DNA双螺旋模型要点 B型结构(相对湿度为92%) 两条链反向平行,右手螺旋 碱基在内(A=T,G≡C)碱基平面垂直于螺旋轴 戊糖在外,双螺旋每转一周 为10碱基对(bp) DNA双螺旋的多样性: A型结构(相对湿度为75%) 每圈为11对碱基,碱基平面倾斜20o,螺旋变粗变短,螺距2.8nm。 Z型结构 左手螺旋,每圈由12对碱基组成,只有小沟,主链中的各磷酸根呈锯齿状排列,螺距4.5nm。 2.0 nm 小沟 大沟 双螺旋DNA的结构参数 20o 0o 7o 0.255 0.34 0.27 11 10 12

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