[旧人教]高中生物实验十一 DNA的粗提取与鉴定.docVIP

第六章实验十一 DNA的粗提取与鉴定 学习目标： 1、掌握原理 2、了解方法步骤 重难点： 原理 知识点 归纳与结论 一、实验原理 DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的_________的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为________mol/L时，DNA的溶解度最______。利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中_______的析出。 DNA不溶于_________溶液，但是细胞中的某些物质可以溶于________溶液。利用这一原理，可以进一步提取出___________的DNA。 DNA遇___________（沸水浴）会染成蓝色，因此，___________可以作为鉴定DNA的试剂。 二、目的要求 初步掌握DNA的________和________的方法，观察提取出来的_____物质。 三、材料用具 鸡血细胞液（5～10mL）。 铁架台，铁环，镊子，三脚架，________，石棉网，载玻片，_______，滤纸，_________，滴管，量筒（100 mL一个），烧杯（100 mL1个，50 mL、500 mL各两个），试管（20 mL2个），___________，试管夹，纱布。 体积分数为________的酒精溶液（实验前置于冰箱内冷却____h），蒸馏水，质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液，物质的量浓度分别为____mol/L和_____mol/L的氯化钠溶液，二苯胺试剂。 四、方法步骤 实验前需要制备___________________。 1、提取鸡血细胞的细胞核物质 向盛有鸡血细胞液的烧杯中加入__________20mL，同时用快速搅拌， 学习过程 使血细胞加速。然后过滤，取其________液。 2、溶解细胞核内的DNA 将物质的量浓度为____mol/L的氯化钠溶液40mL加入到滤液中，混合均匀，使DNA在溶液中呈____________状态。 3、析出DNA的粘稠物 沿烧杯内壁缓缓加入____________，同时用玻璃棒搅拌，这时烧杯中出现______________色的丝状物。继续加入蒸馏水，当粘稠物不再________时停止加入蒸馏水（这时溶液中氯化纳的物质的量浓度相当于_____mol/L）。 4、滤取含DNA的粘稠物 用漏斗过滤步骤3中的溶液，含__________的粘稠物被留在纱布上。 5、将DNA的粘稠物再溶解 用钝头镊子将纱布上的______物夹至物质的量浓度为_____mol/L的氯化钠溶液中，用玻璃棒搅拌，使粘稠物_______________溶解于溶液中。 6、过滤含有DNA的氯化钠溶液 用漏斗过滤步骤5中的溶液，取其溶液，_____________溶于溶液中。 7、提取含杂质较少的DNA 将________的、体积分数为95﹪的酒精溶液5mL加入到含有DNA的滤液中。搅拌后，溶液中会出现___________的丝状物。这种丝状物的主要成分是__________。这时丝状物成________色。 8、DNA的鉴定 取两支试管，各加入物质的量浓度为____mol/L的氯化钠溶液5mL，将_________放入其中一支试管中，使其溶解。然后，向两支试管中各加入4mL的__________试剂。混合均匀后，将试管置于水中加热5分钟。待试管冷 却后，比较两支试管中溶液_______________的变化。 五、结论 1、可以利用DNA溶于__________溶液，在其物质的量浓度为_____mol/L时溶解度最低的原理，来提取______________________。 2、溶解丝状物氯化钠溶液，遇二苯胺（沸水浴）变为______色，这说明丝状物是________物质。 反馈训练 一、选择题 1、DNA粗提取步骤1中加入蒸馏水的目的是（ ） A、稀释溶液 B、是血细胞吸水胀破 C、冲洗DNA D、溶解DNA 2、DNA粗提取步骤3中加入蒸馏水的目的是（ ） A、稀释溶液 B、是血细胞吸水胀破 C、使DNA在低浓度氯化钠溶液中析出 D、溶解DNA 3、氯化钠的物质的量的浓度为（ ）时，DNA的溶解度最低 A、0.12mol/L B、0.13mol/L C、0.14mol/L D、0.15mol/L 4、DNA不溶解于（ ） A、氯化钠溶液 B、氯化钾溶液 C、乙醇 D、氯化镁溶液 5、鉴定DNA的试剂是（ ） A、斐林试剂 B、苏丹Ⅲ试剂 C、双脲试剂 D、二苯胺试剂 6、在向溶解DNA的氯化钠溶液中，不断加入蒸馏水的目的是（ ） A、加快溶解DNA的速度 B