分离科学温习说课.ppt

LOGO * 模板来自于 * 应用化学15级研 李宁 107551400553 分离科学温习 关于色谱 1 GC与LC的对比理解学习 2 GC-MS与LC-MS及MS-MS的对比理解学习 3 写于最后 4 CONTENTS 如何定性，定量 01 ·色谱是一种分离技术，是分离混合物的有效手段 当流动相中携带的混合物流经固定相时，其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中流出。 1.利用纯物质定性的方法 利用保留值定性：通过对比试样中具有与纯物质相同保留值的色谱峰，来确 定试样中是否含有该物质。不适用于不同仪器上获得的数据之间的对比。 利用加入法定性：将纯物质加入到试样中，观察各组分色谱峰的相对变化。 2.保留指数 是一种重现性较好的定性参数。测定方法： a.将正构烷烃作为标准，规定其保留指数为分子中碳原子个数乘以100 （如正己烷的保留指数为600）。 b.其它物质的保留指数（IX）是通过选定两个相邻的正构烷烃，其分别具有Z和Z＋1个碳原子。被测物质X的调整保留时间应在相邻两个正构烷烃的调整保留值之间 项目 归一化法 外标法 内标法 大致过程 在一定分析条件下，样品经过直接溶解，过滤等操作以后,直接进分析仪器检测，得到色谱图。,直接进分析仪器检测，得到色谱图。 用待测组分的纯品作为对照物质，以对照物质和样品中待测组分的响应信号（即峰面积大小）相比较进行定量的方法。 选择样品中不含有的纯物质作为内标物加入待测样品中，以待测组分和内标物的响应信号（即峰面积大小）对比，对待测组分定量的方法。 优点 进样量准确度无关、与仪器和分析条件有关。 简便；只关注待测成分出峰，不需要所有成分出峰。 a.是一种比较准确的定量方法；b.定量结果与进样量重复性无关（在色谱柱不超载范围内）；c.只需要内标物与被测物出峰，达到一定的分离度即可；d.常用于样品的GC定量检测以及微量成分含量检测； 缺点 a.在此条件之下，所有有效组分必须出峰，且所有组分必须在一个分析周期内流出色谱峰；b.定量计算必须先知道各成分的校正因子，校正因子的求出较麻烦。 a.必须有被测组分的纯品作为标准对照物；必须有被测组分的纯品作为标准对照物；b.此方法准确性受进样重复性和实验条件稳定性的影响。此方法准确性受进样重复性和实验条件稳定性的影响。 配置较麻烦；内标物需要跟待测组分在同样条件下出峰，且分离度较好，所以选择合适的内标物比较困难。 02 气相色谱法 高效液相色谱法 对象 气体和低沸点 稳定性好、高沸点液体 流动相 惰性气体，仅仅起运载作用。 可与被分析样品产生相互作用，并能改善分离的选择性。相当于改进一个参数。 温度 较高 室温 进样方式 样品需加热气化或裂解 样品制成溶液 检测器 最常用氢火焰检测器 紫外检测器、光电二极管阵列检测器、示差折光检测器、荧光检测器。 提高分离效率的方法 程序升温 梯度洗脱 气相色谱条件选择： 1.进样方式和进样量的选择 2.气化温度：等于或稍高于样品的沸点 3.色谱柱：相似相容 填充柱和毛细管柱 4.柱温：程序升温 5.检测器：不小于100°C，以防止冷凝，一般高于柱温30—50°C 相比于气相色谱，LC在技术上采用了 高压泵 高效固定相 高灵敏度检测器 因而 具备速度快、效率高、灵敏度高、操作自动化的特点。 高压输液泵 因为液相色谱固定相颗粒极细，所以对于流动相阻 力很大，为使流动相较快流动，必须配备有高压输液系统。 高压输液泵是高效液相色谱仪最重要的部件 应具有压力平稳，脉冲小，流量稳定可调，耐腐蚀等特性。 高固定相—色谱柱 色谱柱是液相色谱的心脏部件，它包括柱管与固定相两部分，柱体为直形不锈钢管。一般色谱柱长5～30cm，内径为4～5mm。 发展趋势是减小填料粒度以提高柱效。 注意：每个色谱柱的流向都是固定的。 类型 优点 缺点 紫外检测器光 电二极管阵列检测器 原理、结构简单，灵敏度高、适用于大多数化合物检测，可以梯度洗脱，不坏样。 对某些化合物不灵敏，受流动相的影响 示差检测器 响应所有物质、信号强度和浓度成正比 灵敏度低，对压力敏感，不能梯度洗脱，受温度影响大。 荧光检测器 高灵敏、高选择 无荧光或无法赋予荧光的物质无法检测 液液分配色谱 离子对色谱 离子色谱 体积排阻色谱 基本 原理 与液液萃取相同 物质在两种互不相溶的液体中溶解度的不同 将对离子加到流动相中，使其与溶质离子结合形成离子对，从而控制溶质离子保留行为的一种色谱法。 适用于