转基因动物用微生物安全性评价总结.ppt

生物安全Biosafety动、植物用转基因微生物的安全性 红河学院生命科学与技术学院 微生物的特点 个体小 繁殖快 数量大 易变异 分布广泛 生命力强 容易扩散 内容提要 （1）动、植物用转基因微生物的发展概况； （2）动物用转基因微生物的安全性评价（受体微生物的安全性评价、转基因操作的安全性评价、动物用转基因微生物的安全性评价、动物用转基因微生物产品的安全性评价）； （3）植物用转基因微生物的安全性评价（受体微生物的安全性评价、转基因操作的安全性评价、植物用转基因微生物的安全性评价、植物用转基因微生物产品的安全性评价）； （4）动、植物用转基因微生物的安全管理（国外、国内）。 动、植物用转基因微生物的定义 动物用转基因微生物主要包括动物用转基因活疫苗和动物用转基因活微生物饲料添加剂； 植物用转基因微生物是指通过重组DNA技术研制的，直接应用于植物上具有杀虫、防病、固氮、调节生长等作用的微生物。 （一）转基因微生物概况 转基因动物用微生物的研究与开发起步于20世纪80年代初 口蹄疫病毒是最早研究的对象 国际上发达国家对基因工程疫苗的研究与开发十分重视 已相继研制成功一些用于动物疫病免疫预防用的基因工程亚单位疫苗、基因工程重组活载体疫苗、基因缺失疫苗、DNA疫苗等 1.转基因微生物饲料添加剂 酶制剂 以基因工程研制能高效表达植酸酶的重组毕氏酵母。 抗菌肽 减少或完全替代抗生素药物。 重组生长激素 2.基因工程亚单位疫苗 利用体外表达系统（如大肠杆菌，酵母，动物细胞，杆状病毒-昆虫细胞等） 表达病毒的主要保护性抗原蛋白作为亚单位疫苗 不仅具有优良的安全性，而且便于规模化生产 利用非疫苗用蛋白作为抗原建立的诊断方法将可以区分亚单位疫苗免疫的动物和自然感染的动物 涉及动物病原 大多数禽、猪、牛等动物的病原体 免疫原性蛋白（保护性抗原） FMDV VP1、狂犬病病毒的囊膜蛋白G，AIV HA蛋白，伪狂犬病病毒的囊膜糖蛋白gP50，新城疫病毒F和HN蛋白, 传染性法氏囊病毒VP2蛋白，传染性胃肠炎病毒的纤突蛋白，鸡传染性贫血病病毒的衣壳蛋白（VP1）………. 2.基因工程重组活载体疫苗 痘病毒、疱疹病毒、腺病毒或细菌作为载体 具有常规弱毒疫苗的所有优点 便于构建多价疫苗 利用非疫苗用基因或其表达产物可以建立鉴别诊断方法 利用痘病毒作为载体 痘苗病毒 数十种病原的基因在痘苗病毒中进行了表达，都显示出不同程度的免疫保护性。比较成功的有表达狂犬病病毒G蛋白的重组痘苗病毒和表达牛瘟病毒F和HA蛋白的重组痘苗病毒疫苗 禽痘病毒（鸡痘病毒、金丝雀痘病毒、鸽痘病毒 ） 新城疫病毒F和HN蛋白 禽流感病毒的HA和NP蛋白 马立克氏病毒gB糖蛋白 禽白血病囊膜蛋白 传染性法氏囊病病毒VP2蛋白 禽网状内皮增生症病毒囊膜蛋白 火鸡出血性肠炎病毒Hexon蛋白 利用腺病毒作为载体 目前已有许多外源基因被插入腺病毒并得到表达 SIV 水疱性口炎病毒 狂犬病病毒 牛副粘病毒3型 牛疱疹病毒I型 牛冠状病毒 猪传染性胃肠炎病毒 利用疱疹病毒作为载体 火鸡疱疹病毒、伪狂犬病病毒、牛疱疹病毒I型和鸡传染性喉气管炎病毒 已完成动物试验并显示出良好前景的重组疱疹病毒疫苗： 口蹄疫病毒VP1基因，猪瘟病毒E2基因，猪繁殖与呼吸综合症病毒GP5基因，猪流感病毒HA基因的重组伪狂犬病毒疫苗 表达传染性法氏囊病毒VP2基因的重组马立克氏病毒疫苗 表达禽流感病毒HA基因的重组传染性喉气管炎病毒疫苗 利用细菌作为载体 大肠杆菌 沙门氏菌 李氏杆菌 目前国际上基因工程疫苗研究与开发的热点之一 3.基因缺失疫苗 一类发展前景很好的基因工程疫苗 伪狂犬病基因缺失疫苗(双基因和三基因缺失疫苗，如TK-/gG-、TK-/gE-、TK-/gC-和TK-/gE-/gI-等，并已商品化生产 牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）TK基因缺失疫苗 4. DNA疫苗 DNA疫苗可诱导机体同时产生体液免疫和细胞免疫 已发现DNA接种对许多病毒、细菌、寄生虫感染以及肿瘤的预防均有一定的效果 其他疫苗 可食性疫苗(利用转基因植物) 多表位疫苗 T细胞疫苗 RNA复制子疫苗 基因工程疫苗的产业化与应用是目前和今后的发展趋势 含狂犬病毒gB基因的重组牛痘病毒疫苗，已在北美和欧洲广泛应用于预防野生动物的狂犬病 TK和gE双基因缺失的伪狂犬病疫苗已在美国和大部分欧盟国家广泛应用于预防猪伪狂犬病和猪伪狂犬病根除计划 TK和gE双基因缺失的牛传染性鼻气管炎病毒疫苗也在许多国家使用，荷兰于1998年5月在全国范围内推广使用TK和gE双基因缺失的疫苗以便根除此病 表达禽流感病毒HA基因的重组鸡痘病毒疫苗和表达新城疫病毒F基因的重组鸡痘病毒疫苗也已获得美国农业部注册，开始产业化生产 2、国内研发情况