ESI和APCI的选择与优化讲课.pptVIP

优化ESI和APCI进行在线LC/MS分析－溶液化学课程 在这一部分，你将学习： 什么类型的样品最适合电喷雾和APCI。 流动相的pH值和离子添加剂如何影响电喷雾和APCI模式的离子化。 对APCI如何选择离子对试剂和缓冲液。 当使用挥发性缓冲液－TFA Fix时如何克服离子抑制。 适合电喷雾的样品 影响电喷雾离子化的因素 溶液的化学性质 流速 样品pKa 溶液pH 溶液导电性 针的设置 内部针的位置 针的状况 喷雾压力 高电压电极 毛细管和喷雾室电压设置 毛细管和喷雾室高压的条件 绝缘体的条件 溶液化学性质 离子检测极性和pH选择的一般规则－ESI pH影响－溶菌酶（ MW 14306 ） 溶液中离子的形成：负离子检测 API-MS添加剂 使用挥发性离子对试剂 正离子ESI模式中的离子对试剂 挥发性缓冲液浓度对ES信号的影响 ESI：在较高缓冲液浓度时，由于离子配对的原因，分析物从液滴中逸出较困难。如咖啡因这样的较小的分子，在离子化过程的早期被解吸。 缓冲液对ESI信号的影响 用不挥发性盐基体，进样635次后的ESI信号 在信号中最初的衰减可能是由于不导电层沉积在电极上导致电场强度的变化，这个不导电层形成后，信号就稳定了。 与APCI源中看到的白色粉末相反，在喷射防护屏上看到的棕色物质，这可能是来自于平衡的盐溶液中的葡萄糖。 在不同比例乙腈中青霉素的响应 为什么需要挥发性缓冲液TFA Fix？ TFA Fix 为什么用丙酸？ 用优化的TFA Fix 100%水相，信号增强 丙酸的柱后添加，改善使用25 mM HFBA分离的b-内酰胺的响应 电喷雾中的阳离子 通过柱后添加对电喷雾产生最佳的化学效果 LC溶剂的柱后修正以优化API-MS响应 适合APCI的样品 APCI APCI蒸发温度 挥发性缓冲液浓度对APCI信号的影响 APCI：乙酸钠最初有助于利血平质子的转移，增加“挥发性盐”的浓度，使有效挥发分析物更困难。咖啡因是比利血平更弱的碱，氨会争夺质子。 不挥发缓冲液对APCI信号的影响 用APCI做氯吡嗪磺胺的流动注射分析 600次盐溶液进样后的APCI喷雾室 600次盐溶液进样后的APCI信号 信号中最初的不稳定可能是由于当盐沉积在源里时，电场的变化引起的。 当盐的薄层形成后，信号就稳定了，显示出稳定的衰减流速。 600次带有自动转换的进样后的APCI喷雾室 在APCI模式中离子对试剂对LC/MS分析的影响 电喷雾和APCI的比较 参考文献　 min 0.5 1 1.5 2 2.5 0 50000 100000 150000 200000 250000 300000 350000 Abundance Injection #1 Injection #300 Injection #600 APCI Signal Relative to UV Signal 0 10 20 30 40 50 60 0 100 200 300 400 500 600 Injection # MS Amount/UV Amount 进样后流动转向废液1分钟合喷雾室干净得多 对降肾上腺素（挥发性很好的分析物）， VA和PFHA作为强的气相酸有助于离子化过程。 HAS不会提高信号，因为它不挥发。 MGBG强烈离子配对，表现出极大地降低响应。 灵敏度 如果样品用两种技术都可以离子化，电喷雾通常较灵敏，且背景噪音低。 基质和流动相影响 电喷雾对样品和溶剂基质比APCI更灵敏（例如，信号抑制） 相对于APCI，电喷雾要求较低的挥发性缓冲液浓度 有机溶剂选择极大地影响APCI的离子化 流速 电喷雾在低流速（100 μL/min）工作较好，而APCI不是 在高流速时（750 μL/min），APCI比电喷雾更灵敏，且具有低噪音 会议 美国质谱协会： Montreux LC/MS专题研讨会： 点击Montreux LC/MS 书籍 ·?????? 电喷雾离子化质谱：基础，仪器和应用，Richard Cole, John Wiley and Sons编 (ISBN #0-471-14564-5)，1997. ·?????? LC/MS综述，Ross Willoughby, Edward Sheehan, Sam Mitrovich, Global View Publishing (ISBN# 0-9660813-0-7) Pittsburgh，PA，1998. ·?????? 液相色谱－质谱法（第二版），W.M.A. Niessen, Marcel Dekker Publishing (ISBN #0-8247-1936-0)，1999. An ion-pair reagent is added to the mobile