肝炎病毒核酸检测及临床诊疗最新进展教程方案.pptVIP

可以先介绍下目前我国乙肝、丙肝的整体情况（如感染人数，携带者，发病率等等）。然后讲讲我们目前对这些疾病的治疗监测手段和用药终点的确定方式。 肝炎病毒核酸检测及临床诊疗最新进展 汇报人： 目录 Part 1 肝病PCR检测国内外需求及现状 Part 2 肝病PCR检测最新解决方案 Part 3 肝病PCR检测的发展趋势 目录 Part 1 肝病PCR检测国内外需求及现状 Part 2 肝病PCR检测最新解决方案 Part 3 肝病PCR检测的发展趋势 国际需求 2008年美国肝病协会CHB防治指南：持久消除HBV是乙肝的治疗终点，HBV DNA病毒载量尽可能小于或等于10 IU/ ml。 国际需求 欧洲肝病研究学会EASL2010年指南指出：将HBV DNA病毒载量尽可能控制在10-15 IU/ ml，能有效防止疾病的复发。 欧洲肝病研究学会EASL2011指南指出：丙肝患者治疗的目标需HCV RNA病毒载量低于50 IU/ ml。 （一） 核苷(酸)类似物治疗慢性乙肝路线图  治疗第12周 评估原发性治疗失败 HBV-DNA水平较基线水平下降幅度1log/ml 开始治疗 HBV-DNA基线水平监测 病毒学完全应答 HBV-DNA60 IU/ml 继续治疗 监测HBV-DNA/6个月 病毒学部分应答 HBV-DNA:60 ~2000 IU/ml 增加药物治疗 监测HBV-DNA/3个月 病毒学不充分应答 HBV-DNA2000 IU/ml 增加/更换有效的药物治疗 监测HBV-DNA/6个月 治疗第24周 评估抗病毒疗效的早期预测因子 60IU/ml如何检测？ 国际治疗路线 * 由美国坦福大学医学中心Keeffe教授（专家组）提供 国内行业指导原则 国家SFDA技术审评中心“863”课题《 HBV DNA定量试剂技术审评指导原则》中指出： HBV DNA建议最低检测限应≤30 IU/mL。 DNA提取纯化方法不建议采用煮沸法进行DNA提取。 国内行业标准 内标全程参与！ 核酸上样量≥20 ul！ 国内现状 加热煮沸 高速离心 过柱吸附 陈旧的技术 繁琐的过程 国内现状 国内HBV DNA检测方法多为煮沸法，试剂灵敏度均为500IU/ml或1000IU/ml。 国内大部分HCV RNA检测方法多为柱提法，试剂灵敏度≥1000IU/ml。 令人揪心的性能 专家呼吁 五种乙型肝炎病毒核酸荧光定量检测试剂盒的比较,中华传染病杂志，2009年 第3期——吴星,黄维金, 周诚 ,庄辉 等(中国药品生物制品检定所,北京大学医学部) 国家“十一五”科技重大专项 “乙型和丙型病毒性肝炎诊断及临床监测的研究” ——鲁凤民教授 北京大学肝炎试剂研究中心 专家呼吁：高精度，超敏感的核酸诊断试剂的开发是目前肝炎诊疗中的关键步骤！ 何去何从 面对当前肝病毒核酸检测技术的现状，我们真没有办法了吗？ 解决方案 Part 1 肝病PCR检测国内外需求及现状 Part 2 肝病PCR检测最新解决方案 Part 3 肝病PCR检测的发展趋势 临床核酸提取技术的发展： 煮沸法 酚氯仿法 旋转离心柱法 玻璃粉吸附法 二氧化硅吸附法 磁珠法 国内主流方法 国际主流方法 核酸检测发展要求 核酸检测发展要求 高精度 高品质 高科技 磁珠法技术 磁珠（电子显微镜） 磁珠分离器 磁珠法 ----核酸诊断领域新方向。 技术原理 DNA 磁珠与DNA的结合 ----通过超顺磁性颗粒富集核酸，实现样品高纯度、高灵敏度的检测。 原理 技术性能 磁珠法提取核酸效率高，纯度高，特异性好。 采用最新一代的磁珠提取核酸技术，无需加热、无需高速离心、灵敏度极高，能够很好的满足临床诊疗的需求。 抗干扰能力强，能胜任高血脂、强溶血以及药物治疗标本的检测，是临床疾病检测的有力手段。 极易实现自动化。 灵敏度可达10IU/ml，是国产主流试剂的50-100倍； 准确定量线性范围为20IU/ml～2.0×109IU/ml 可检测HBV A、B、C、D、E、F、G、H共8个基因型。 设置了监控内标IC,有效避免假阴性。 设置内参比荧光ROX，定量更准确。 以湖南圣湘乙肝磁珠法为例 临床验证和对比 临床验证和对比 以湖南圣湘乙肝磁珠法为例 * 9例定值在12 ~50 IU/ml之间 圣湘磁珠法技术在灵敏度方面存在明显优势，与进口试剂具有很好的一致性，能够很好的胜任临床药物疗效的观察和治疗终点的确定。 Sansure-HBV ：圣湘HBV磁珠法 Roche-HBV ：罗氏 AmpliPrep-Cobas TaqMan HBV Test X-HBV：国内一家上市公司的HBV产品（浓缩煮沸法） 发展趋势 Part 1