高级微生物期末试题解释.doc

y结合自己的专业，围绕一种微生物资源的开发，设计一种产品，说明理由，产品的技术方案，及质量标准。 SFTVS重组活载体疫苗 发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)是近年在我国新发现的一种布尼亚 病毒,病人的主要症状为发热、血小板减少、白细胞减少、消化道症状和多脏器 功能损伤。目前已在河南、湖北、山东、江苏、安徽、辽宁等16个省发现发热 伴血小板减少综合征(SFTS)病例,病人平均死亡率在10%左右。目前尚没有 有效的疫苗可以使用,研制安全有效的预防用疫苗成为了应对SFTS疫情的迫切 需要。 重组活载体疫苗是利用微生物做载体，将保护性抗原基因重组到微生物体中，使用能表达保护性抗原基因的重组微生物制成的疫苗。 优点：疫苗多为活疫苗，重组体用量少，抗原不需纯化，载体本身可发挥佐剂效应增强免疫效果 一、疫苗制备 第一步是分离目的基因，获得目的DNA片段的方法主要有两种，一是直接从细胞基因组中分离，二是人工合成。 ?第二步是将DNA片段和载体在体外连接重组，成为重组DNA分子，多采用连接酶的方法连接。 第三步是基因克隆，即将重组体DNA分子转入大肠杆菌中增殖。 第四步是目的基因克隆的筛选与鉴定，即从大量携带重组体DNA分子的细胞中分离出带目的基因的细胞。 1）在含有一定浓度抗生素的选择培养基上筛选 2）酶切鉴定， 3——）PCR鉴定，测序分析 第五步是目的基因诱导表达 6、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及western blot 分析 二、质量标准试验 1、蛋白浓度的测定（采用BCA蛋白定量试剂盒测定病毒滴度 7、疫苗免疫持续期，和疫苗保存期检测 针对你设计的产品，如果要申请知识产权保护其核心竞争力，你认为应该从哪些角度进行申请，主要目的是什么。如何保证你申请的知识产权能够被授权 产品发明专利， 发热伴血小板出血热疫苗发明，目前尚无发热伴血小板减少综合征疫苗。 外观改进，申请外观设计专利 可以实验方法的改进上，申请实用新型专利。 申请专利目的：?其一，通过法定程序确定发明创造的权利归属关系，从而有效保护发明创造成果，独占市场，以此换取最大的经济利益，及时申请专利就是要防止其发明创造成果被他人随意使用，丧失其应有的价值。 ?????其二，及时申请专利是为了在市场竞争中争取主动，防止竞争对手将相同的发明创造申请专利，从而确保自身产品生产与销售的安全可靠性。 三、多角度申请专利可以增加申请的知识产权被授权的可能性 如何保证你申请的知识产权能够被授权 二、将帮助专利代理人更好的起草专利文件。可以评价专利申请获得授权的可能性。　　据国外专利机构调查，有66%以上的发明专利最后不能获得授权，其中绝大多数都是因为存在在先公开的文献，缺乏新颖性而致。　　二、将帮助专利代理人更好的起草专利文件。　　通过申请前的初步专利检索，可以获得理解现有技术所需的必要信息，这样可以比较现有技术，描述本申请所具有的有益效果和创造性，以及与现有技术的本质区别。这对于将来的实质审查是非常重要的。　　三、申请前的初步专利检索将完善申请方案。　　通过申请前的初步检索，可以获得一些相关的对比文件，其中很有可能包含着可以借鉴之处，这有助于申请人完善技术方案，以更好的提出技术方案，获得最佳的保护效果。　　四、申请前的初步专利检索能为你节省时间和金钱。　　通常，从发明专利申请到专利授权或不予授权的时间。如果申请人不在申请专利前进行初步的专利检索，一旦专利没有获得授权或保护范围减少，失去的不仅仅是申请的费用，更重要的是损失了宝贵的时间和精力。　　通过申请前的初步专利检索，可以获得理解现有技术所需的必要信息，这样可以比较现有技 定法两大类,分成4 个水平:细菌形态和生理生化水平、 细胞组分水平、蛋白质水平和核酸水平。 　细菌常规鉴定法 细菌常规鉴定法是细菌形态和生理生化水平及蛋白质水平的鉴定,前者是最经典、最常用的分类鉴定指标,也是现代化分类鉴定的依据,后者包括免疫诊断技术、蛋白质图谱分析和氨基酸序列分析等。 一、形态学特征鉴定：（1）细胞形态 在显微镜下观察细胞外形大小、形状、排列等，细胞构造，革兰氏染色反应，能否运动、鞭毛着生部位和数目，有无芽孢和荚膜、芽孢的大小和位置，放线菌和真菌的繁殖器官的形状、构造，孢子的数目、形状、大小、颜色和表面特征等。 （2）群体形态 群体形态通常是指以下情况的特征：在一定的固体培养基上生长的菌落特征，包括外形、大小、光泽、黏稠度、透明度、边缘、隆起情况、正反面颜色、质地、气味、是否分泌水溶性色素等；在一定的斜面培养基上生长的菌苔特征，包括生长程度、形状、边缘、隆起、颜色等；在半固体培养基上经穿刺接种后的生长情况；在液体培养基中生长情况，包括是否产生菌膜，均匀浑浊还是发生沉淀，有无气泡，培养基的