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一、定性分析 定性鉴别的依据→吸收光谱的特征 吸收光谱的形状 吸收峰的数目 吸收峰的位置（波长） 吸收峰的强度 相应的吸光系数 定性分析与纯度检查 续前 1.对比吸收光谱的一致性 同一测定条件下， 与标准对照物谱图或标准谱图 进行对照比较 续前 2.对比吸收光谱的特征值 ， 续前 3.对比吸光度或吸光系数的比值： 例： 续前 二、纯度检查和杂质限量测定 1．纯度检查（杂质检查） 1）峰位不重叠： 找λ→使主成分无吸收，杂质有吸收 →直接考察杂质含量 2）峰位重叠： 主成分 杂质 与纯品比较 强吸收 无吸收 or弱吸收 弱吸收 强吸收 E↓ E↑ 续前 2. 杂质限量的测定： 例：肾上腺素中微量杂质——肾上腺酮含量计算2mg/mL -0.05mol/L的HCl溶液，λ 310nm下测定规定 A310≤0.05 即符合要求的杂质限量≤0.06% 例：维生素B12水溶液在361nm处的 =207，L=1cm，测得A=0.414，求：C=? 解：C= A/El = 0.414/207×1 = 0.002（g/100mL） =2?10-5g/mL 一、单组分样品定量方法 定量方法 吸光系数法 标准曲线法 对照法 ? 定量依据: A总= Aa +Ab +Ac +…… 解法: A1a+b=A1a + A1b=E1a·Ca + E1b·Cb A2a+b=A2a + A2b=E2a·Ca + E2b·Cb 二、多组分样品的定量方法 等吸收双波长法 例：消去b干扰，测a物质 ①绘制a、b绘物质的吸收光谱 ②选波长λ1、λ2(b等吸收，a的△A大) ③测定：λ1 A1a+b=A1a+A1b λ2 A2a+b=A2a+A2b ④计算 Ca=？ A=A2-A1 =(A2a+A2b )-(A1a+A1b ) =(A2a-A1a)+(A2b-A1b) =(E2a-E1a)CaL =KCa 计算公式： 测A消B △Aa=(Eλ2a – Eλ1a )Ca 测B消A △Ab=(Eλ2b – Eλ1b )Cb 选择波长原则：干扰组分在两波长的吸光度相等， 待测组分在两波长的吸光度差值 △A应足够大。 练习 解： 1．取咖啡酸，在165℃干燥至恒重，精密称取10.00mg，加少量 乙醇溶解，转移至200mL容量瓶中，加水至刻度线，取此溶 液5.00mL，置于50mL容量瓶中，加6mol/L的HCl 4mL，加 水至刻度线。取此溶液于1cm比色池中，在323nm处测定吸 光度为0.463，已知该波长处的E=927.9，求咖啡酸百分含量. 练习 解： 2．精密称取0.0500g样品，置于250mL容量瓶中，加入0.02mol/L HCl溶解，稀释至刻度。准确吸取2mL，稀释至 100mL。以0.02mol/L HCl为空白,在263nm处用1cm吸收池 测定透光率为41.7%，其摩尔吸光系数为12000，被测物分 子量为100.0，试计算263nm处E和样品的百分含量。 3. 分别用0.5mol/L HCl、0.5mol/L NaOH和pH4.00的邻苯二甲酸氢钾缓冲液配制某弱酸溶液，浓度均为含该弱酸0.001g/100ml。在590nm处分别测出三者吸光度如下。求该弱酸的pKa值 。 A（?max=590nm） 主要存在形式 pH 4 0.430 [HIn]与[In-] 碱 1.024 [In-] 酸 0.002