专题2_微生物的培养与应用复习论述.ppt

专题2 微生物的培养与应用 一、微生物的培养与应用 1.微生物的实验室培养 (1)培养基 ①概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求, 配制出供其生长繁殖的营养基质。 ②分类 a．按培养基的物理性质可以分为液体培养基 和固体培养基。 b．按培养基的用途可以分为选择培养基和鉴 别培养基。 划分 标准 培养基种类 特点 物理 性质 液体培养基 不加凝固剂 固体培养基 加凝固剂， 如琼脂 用 途 选择培养基 培养基中加入某种化学物质，用来抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长 培养和分离出特定微生物(如分离酵母菌和霉菌，可以在培养基中加入青霉素) 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品 鉴别不同种类的微生物，如用伊红——美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否含有大肠杆菌 【特别提醒】 选择培养基一般只生长具有特定目的的微生物，鉴别培养基可以存在其他微生物，而且能鉴别特定的微生物。 Q3:培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入_____________ 以纤维素作为唯一碳源的选择培养基，可以分离分解纤维素的微生物。 Q1:分离利用石蜡油的微生物，用____________________的培养基 Q2:分离产生蛋白酶的微生物，用___________________的培养基 Q4:分离固氮微生物用______的培养基。 以石蜡油作为唯一碳源 以蛋白质作为唯一氮源 青霉素 缺氮 ③培养基配方及营养要素 基本营养要素： 各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐 此外还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。 无菌技术主要操作要求 a．实验前应对操作空间、操作人员消毒，对所用器具和培养基灭菌。 b．实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区操作，另外要避免已灭菌处理材料再次污染。 (2)无菌技术 （1）消毒和灭菌的区别 培养基 培养皿 空 气 接种环 双 手 牛 奶 ②巴氏消毒 ③化学消毒 ⑤紫外线消毒 ⑥高压蒸气灭菌 ①灼烧灭菌 ④干热灭菌 常用的消毒方法和灭菌方法 2．纯化大肠杆菌以及菌种的保藏 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基： 计算、称量、溶化、 、倒平板。 【友情提醒】平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠。 将平板倒置，既可以防止皿盖上的水珠落入培养基，又可以避免培养基中的水分过快的挥发。 (2)纯化大肠杆菌 ①原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。 (2)纯化大肠杆菌 平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面； 稀释涂布平板法:将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 （2）接种操作: 第一步:灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微 生物污染培养基； 每次划线前:灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后， 接种环上残留的菌种，使下一次划线时， 接种环上的菌种直接来源于上次划线的末 端，从而通过划线次数的增加，使每次划 线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落 划线结束后:灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的 菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 (3)菌种的保藏 ①短期保存：固体斜面培养基上4 ℃保存，菌种 易被污染或产生变异。 ②长期保存：－20 ℃甘油管在冷冻箱中保藏。 二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1．分离的原理 土壤中的细菌能合成脲酶，能把尿素分解成无机物。 2．分离分解尿素的细菌所使用的特定培养基 培养基:选择培养基，培养基中的氮源只有尿素，理论上只有能合成脲酶的微生物才能在上面生长。 KH2PO4 1.4 g