苦丁茶植物资源调查整理和DNA分子鉴定及系统亲缘关系探讨.pdf

中文摘要 可以有效的区分到不同系统发育分支，并且具有非常高的支持率。 木犀科女贞属植物在世界上分布广泛，在许多国家被用作庭院植物，但是某些物 种被报道为入侵种或有毒植物。粗壮女贞及其多个近缘种在我国西南地区用作苦丁 茶，该属植物的形态鉴别存在一定困难，对该属植物进行快速、准确地分子鉴定是必 要的。四种常用的DNA条形码序列：核基因组核糖体内转录间隔区(ITS)和叶绿 特征法、两种系统发育树构建法(NJ邻接法、MP最大简约法)及TAXONDNA分 析被用于评价四种备选序列对该属20个物种，94个样本的鉴定能力。结果显示ITS 序列具有最多的变异信息，其次为加日龟，M，朋口Ⅸ，，．6吐。运用BLAST比对，所 有序列都能够在属水平鉴别物种。在物种水平上，通过邻接法构建系统发育树显示 合序列特征法或最大简约法建树显示加2f，_筇拟的鉴别能力提高至88．9％。通过结合 邻位相接树和序列特征法或最大简约树法，ITS序列可以将实验中所有物种进行区 分。 冬青科植物在世界上分布广泛，其中著名的巴拉圭茶在拉丁美洲家喻户晓，我国 冬青属有许多传统的药用植物，冬青科苦丁茶是苦丁茶的主流品种。本文应用核基因 组内转录间隔区ITS以及5．8S rDINA对不同的冬青属苦丁茶原植物以及冬青属传统药 用植物铁冬青、毛冬青、落霜红等以及拉丁美洲的巴拉圭茶和美国的代茶冬青等27 种冬青属植物进行分子鉴定研究。应用冬青属的专属引物对，对冬青属的ITs和5．8S rDNA序列进行扩增和测序，得到的有效序列可以提供足够的鉴别信息来区分实验中 所有的物种，该鉴别方法可以快速、有效鉴定冬青属植物。 苦丁茶是同名异物的一类植物资源，其不同的原植物间存在或远或近的亲缘关 系。根据药用植物亲缘学的思想，亲缘关系较近的植物在系统分类、化学成分、药理 作用方面比较相似。通过分子系统学方法构建系统发生树，可以显示不同苦丁茶原植 物的分子系统学关系。结合分子系统学研究和已有的化学成分和药理作用证据，讨论 苦丁茶原植物的亲缘关系为苦丁茶植物资源进一步的研究和开发提供参考依据。 关键词：苦丁茶；本草考证；传统药物学调查；分子鉴定；DNA条形码；女贞属； 冬青属；药用植物亲缘学 2 THESlSoFPh．D．DEGREE Medicnl sciencennd UniDn Medicdl ChineSeAcndemvof Peking CoHege Abstract and identification reIa“onship systematic Investigation，molecular ofKu Cha resources Ding plant PhD Gu Candidate：Jing Xiao SupeⅣisor：Pro￡Pei—gen Pl佣t sciences Acddemy对Medical Devetopme盹chineSe Qnstitute西Medicinal