Raf激酶抑制蛋白对食管癌细胞侵袭能力的影响和其机制研究.pdfVIP

附表……………………………………………………………………72 讨论……………………………………………………………………73 小结……………………………………………………………………75 参考文献………………………………………………………………76 结论………………………………………………………………………79 综述一食管癌的内镜诊治研究现状…………………………………80 综述二Raf激酶抑制蛋白的功能及研究进展……………………………87 致谢…………………………………………………………………………95 个人简历……………………………………………………………………96 中文摘要 Raf激酶抑制蛋白对食管癌细胞侵袭能力的影响及其机制研究 摘 要 食管癌是指发生于食管上皮组织的恶性肿瘤，是常见的恶性肿瘤之 一。其发病年龄多在40岁以上，男性多于女性，但近年来其发病年龄有 年轻化趋势。食管癌的发生涉及多种致病因子、多个阶段、多种基因变异 的积累及相互作用，是一个复杂的过程；在分子水平上涉及多种原癌基因、 抑癌基因以及蛋白质的改变；一些生长因子、受体、信号通路下游因子参 与了食管癌的形成。 kinaseinhibitor Raf激酶抑制蛋白(Raf 取的小分子胞质蛋白，属于磷脂酰乙醇胺结合蛋白家族 (phosphatidylethanolalmine．binding 具有高度保守性，并且很少与其它蛋白家族具有同源性。RKIP广泛表达 于人体多种组织及不同哺乳动物组织中，如猴子和鼠。剐aP可以抑制Raf 信号通路的活性。目前诸多研究显示RKIP表达减少可能会影响细胞生长、 血管生成、凋亡及基因的完整性。RKIP作为一种肿瘤转移抑制蛋白，近 期引起了国内外学者的广泛关注。在前列腺癌小鼠模型中，诱导RKIP表 达可以阻止癌细胞向基底膜侵袭及转移，故可知其对前列腺癌细胞是一种 转移抑制剂。在卵巢癌中RKIP既是转移抑制蛋白又可以抑制肿瘤生长， 这是因为RKIP不但影响卵巢癌细胞的黏附和侵袭能力，而且影响肿瘤细 胞的增殖。研究显示在大部分肿瘤中，如结直肠癌、胃癌、肝细胞癌及胃 肠道间质瘤等，RKIP表达减少与肿瘤进展及患者预后均显示密切相关。 尽管RKIP在肿瘤中的作用已经得到初步揭示，但是在食管癌中的作用却 知之甚少。本实验旨在研究RKIP在食管癌组织中的表达、对食管癌细胞 侵袭能力的影响及其分子生物学机制。本研究实验内容主要包括以下3 部分。 第一部分：RKIP在食管癌组织中的表达 目的：研究RKIP在食管癌组织中的表达情况。 中文摘要 方法：首先采用HE染色，在光学显微镜下观察食管癌组织病理情况， blot及免疫组织化学染色方法测定40例 并进行组织病理学分型。Western 食管癌患者的癌组织、癌旁组织(距病灶2cm)及正常食管组织(距病灶大 于5 RKIP的表达情况。采集患者临床和病理资料，通过统计分析 cm)qu 观察RKIP的表达及其与临床和病理学参数的关系。 结果： (1、)通过对手术切除病理组织标本进行HE染色，确定了40例食管鳞 状细胞癌。 (2’)免疫组织化学结果：RKIP在食管癌组织的表达明显低于癌旁组 织及食管正常组织，RKIP在三者表达中的平均光密度值(meandensity)分 和阳性细胞数进行综合分析，综合评分大于平均值的为RKIP阳性，综合 评分低于平均值的为RKIP阴性，RKIP在癌组织、癌旁组织及正常组织 组织中的表达明显低于正常食管上皮组织(PO．05)。 (3)Western 一步证明RKIP在食管癌组织中的表达明显减少。 (4)临床与病理学参数分析：通过统计学分析发现RKIP在食管癌组 织的低表达与淋巴结及远处转移有关，而与患者性别、年龄、肿瘤的分化 程度和病理分级均无相关性。 结论：食管鳞状细胞癌组织RKIP表达减少，RKIP低表达与患者淋 巴结或远处转移有关。 第二部分：RKIP对食管癌细胞侵袭功能的影响 目的：观察RKIP对食管癌细胞株TE的增殖、凋亡、黏附及侵袭能 力的影响。 感染TE细胞，应用M