第八章脂类的测定精编.ppt

* 二、脂类的测定方法 （二）经过化学处理后再萃取 试剂与仪器 ①巴布科克氏乳脂瓶：颈部刻度有0.0-8.0% ，0.0-10.0%两种，最小刻度值为0.1%。②盖勃氏乳脂计：颈部刻度为0.0-8.0%，最小刻度为0.1%。③乳脂离心机④标准移乳管 （2）仪器 3. 巴布科克氏法和盖勃氏法 * 二、脂类的测定方法 （二）经过化学处理后再萃取 试剂与仪器 （2）仪器 3. 巴布科克氏法和盖勃氏法 巴布科克氏乳脂瓶 盖勃氏乳脂计 * 二、脂类的测定方法 （二）经过化学处理后再萃取 测定方法 精密吸取17.6mL样品，倒入巴布科克氏乳脂瓶中，再取17.5mL硫酸，沿瓶颈缓缓注入瓶中，将瓶颈回旋，使液体充分混合，至无凝块并呈均匀棕色。 置乳脂离心机上，以约1000r/min的速度离心5min，取出，加入80oC以上的水至瓶颈基部，再置离心机中离心2min，取出后再加入80oC以上的水至脂肪浮到2或3刻度处，再置离心机中离心1min，取出后置55~60oC水溶中，5min后立即读取脂肪层最高与最低点所占的格数，即为样品含脂肪的百分数。 3. 巴布科克氏法和盖勃氏法 * 二、脂类的测定方法 （一）直接萃取法 1. 索氏提取法 发展现状 Foss Soxtex索氏抽提系统 1.官方批准的方法2.比传统的索氏法快五倍3.全自动操作，无须看管就可获得精确的结果4.使用专用操作工具，无需手动接触样品5.配合水解装置可进行总脂肪的检测6.批处理能力：6个/批 * 二、脂类的测定方法 （一）直接萃取法 1. 索氏提取法 发展现状 索氏提取仪B-811-瑞士 1.自动化操作，使测定时间缩短到45-60分钟即可完成 2.使用溶剂的沸点达到150℃ 3.高效加热和传热系统实现高效萃取 4、根据样品体积和溶剂回收，调节溶剂的用量 5.集成的加热步骤，可使用惰性气体 6.所有部件均采用惰性连接，因此无样品污染 7.集成的加热元素无需添加附件 * 二、脂类的测定方法 （一）直接萃取法 2. 氯仿-甲醇提取法（GB/T 5009.6—2003） 原理 将试样分散于氯仿-甲醇混合溶液中，在水浴中轻微沸腾，氯仿、甲醇和试样中的水分形成三种成分的溶剂，可把包括结合态脂类在内的全部脂类提取出来。经过滤除去非脂成分，回收溶剂，残留的脂类用石油醚提取，蒸馏出去石油醚后定量。 * 二、脂类的测定方法 （一）直接萃取法 2. 氯仿-甲醇提取法 适用范围与特点 适合于结合态脂类，特别是磷脂含量高的样品，如鱼、贝类、肉、禽、蛋及其制品，大豆及其制品等。 对于这类样品，索氏提取法不能将蛋白、磷脂等结合态脂类完全提取；酸水解法又会使磷脂分解而损失。 本法对高水分试样的测定更为有效，对于干燥试样，可先加入一定量的水，使组织膨润后提取。 * 二、脂类的测定方法 （一）直接萃取法 试剂与仪器 ①?氯仿：97%（体积分数）以上。 ②?甲醇：96%（体积分数）以上。 ③?氯仿甲醇混合液：按2：1体积比混合。 ④?石油醚。 ⑤?无水硫酸钠：以120-135 ℃干燥1-2h。 （1）试剂 2. 氯仿-甲醇提取法 * 二、脂类的测定方法 （一）直接萃取法 试剂与仪器 ①?? 具塞三角瓶 ②?? 电热恒温水浴：50-100 ℃ ③???提取装置 ④? 布氏漏斗：过滤板直径40mm，容量60-100mL ⑤??具塞离心管 ⑥??离心机：3000r/min。 （2）仪器 2. 氯仿-甲醇提取法 * 二、脂类的测定方法 （一）直接萃取法 测定方法 ① 提取 准确称取均匀样品5g于具塞三角瓶内（高水分食品可加适量硅藻土使其分散），加入60mL氯仿-甲醇混合液（对于干燥食品，可加入2-3mL水）。连接提取装置，于65 ℃水浴中，由轻微沸腾开始，加热1h进行提取。 2. 氯仿-甲醇提取法 * 二、脂类的测定方法 （一）直接萃取法 测定方法 ② 回收溶剂 提取结束后，取下烧瓶用布氏漏斗过滤，并用氯仿-甲醇混合液洗涤滤器，烧瓶及滤器中试样残渣，滤液、洗涤液一并收集于具塞三角瓶内，置65-70 ℃水浴中回收溶剂，至烧瓶内物料呈浓稠态，而不能使其干，然后冷却。 2. 氯仿-甲醇提取法 * 二、脂类的测定方法 （一）直接萃取法 测定方法 ③? 石油醚萃取、定量 用移液管加入25ml石油醚，然后加入15g无水硫酸钠，立即加塞混摇1 min ，将醚层移入具塞离心沉淀管进行离心分离（3000r/min）5min。用10mL移液管加入迅速吸取离心管中澄清的石油醚10mL,于已称量至恒量的干燥称量瓶内，蒸发去除石油醚，于100-105 ℃烘箱中烘至恒量（约30 min ）。 2. 氯仿-甲醇提取法 * 二、脂类的测定方法 （一）直接萃取法 结果计算 式中 m-------试样质量，g;