DNA的粗提取与鉴定导学案.docVIP

DNA的粗提取与鉴定 【重难点突破】 一DNA的理化性质有哪些 1．DNA的溶解性 DNA分子和蛋白质等其他分子在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。 DNA不溶于酒精，但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一点，可以将DNA与蛋白质进一步分离。 DNA与蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同。  溶解规律2mol/L NaCl O.14mol/L NaClDNA 溶解析出蛋白质NaCl浓度从2 mol/L降低过程中，溶解度逐渐增大部分发生盐析沉淀 溶解 由上表可以看出，在NaCl为2mol/L时DNA溶解，而部分蛋白质发生盐析而生成沉淀，通过过滤可除去部分蛋白质；NaCl为O.14 mol/L时，DNA析出，过滤可除去溶解的部分蛋白质。 2．DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响(DNA水解酶能水解DNA分子)，大多数蛋白质不能忍受60～80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。洗涤剂能够分解细胞膜但对DNA没有影响。从细胞中提取DNA可用洗涤剂来破坏细胞膜。 3．DNA的鉴定 （1）二苯胺鉴定：在沸水浴的条件下，DNA被二苯胺染成蓝色。 (2)紫外线照射法：配制染色剂。用蒸