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1.2.基于操作基本程序.ppt
基因工程的基本操作程序; 1.目的基因主要是指_____________________;基因文库
怎样从基因文库中得到我们所需的目的基因?;;质粒; 科学家在培育抗虫棉时,经过了许多复杂的过程和不懈的努力,才获得成功。
起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中,然后导入棉花的受精卵中,结果抗虫基因在棉花体内没有表达。
然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端),导入棉花受精卵,长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子(抗虫基因末端),导入棉花受精卵,结果成长的植株,有了抗虫能力。 ;基因表达载体的组成:;启动子:位于基因的首端的一段特殊的DNA片段,它是RNA聚合酶识别和结合的部位,有了它才能驱动基因转录出mRNA,最终获得蛋白质;终止子:位于基因的尾端的一段特殊的DNA片段,能终止mRNA的转录。;基因工程载体的构建需要考虑哪些因素 ;;;;PCR技术—聚合酶链式反应;③过程:;四种脱氧核苷酸(dNTP) ;利用PCR技术扩增目的基因;3)人工合成:通过DNA合成仪直接合成目的基因;农杆菌转化法 ;⑵导入动物细胞:
------显微注射技术;2.微生物作受体细胞原因:;基因探针(DNA探针)与目的基因杂交,有无杂交带;检测目的基因是否转录出了mRNA ;检测目的基因是否翻译出蛋白质 ;例:用棉铃饲喂棉铃虫,如虫吃后不出现中毒症状,说明未摄入目的基因或摄入目的基因未表达。如虫吃后中毒死亡,则说明摄入了抗虫基因并得到表达。;各种大小的电泳仪;1.下表关于基因工程中有关基因操作
的名词及对应的内容,正确的组合是 ;3.细菌的质粒分子带有一个抗菌素抗性基因,该抗性基因在基因工程中的主要作用是
A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性
B.有利于对目的基因是否导入进行检测
C.增加质粒分子的分子量
D.便于与外源基因连接
4. 有关基因工程的叙述正确的是
A.限制酶只在获得目的基因时才用
B.重组质粒的形成是在细胞内完成的
C.质粒都可作为运载体
D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料;5.哪项不是基因表达载体的组成部分( )
A.启动子 B.终止密码
C.标记基因 D.目的基因
6.下列哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法( )
A.基因枪法 B.显微注射法
C.农杆菌转化法 D.花粉管通道法;结束!;(1)从基因文库中获取目的基因;;②基因文库的构建;文库类型;基因组DNA文库的构建
;(3)人工合成:(通过DNA合成仪用化学方法合成DNA );;
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