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表达水稻矮缩病毒外壳蛋白P8基因的转基因水稻具有对该病毒中度的抗性 摘要：对表达水稻矮缩病毒外壳蛋白P8基因的转基因水稻进行了遗传研究，结果表明S8基因在转基因株系T0-2的T1及T2代中稳定遗传并表达。病毒抗性试验结果表明，T1及T2代转基因水稻对病毒表现出中度的抗性，这说明病毒抗性性状可以稳定遗传。这是关于水稻矮缩病毒的病原引起抗性的首次报道。关键词：水稻；水稻矮缩病毒；外壳蛋白基因；病毒抗性 提取 之前我们已经获得的转基因水稻植株水稻（Oryza sativa L.） 含S8因编码的水稻矮缩病毒（RDV）的外鞘蛋白通过粒子轰击。在这项研究中，证实了在S8基因已 稳定遗传和表达的自交T1和初级T2后代 获转基因水稻植株行T0-2。抗病毒实验表明，T1和T2 转基因植株表现出抗RDV感染，说明传动平稳的电阻的特性。这项研究是关于病原体衍生的第一次报告 抗水稻矮缩病毒，phytoreovirus的一员。 介绍 水稻矮缩病毒（ RDV ），这是病原体引起水稻矮缩病，确实埃韦勒损坏水稻生产在东南亚的区域。它是一个构件家庭属phytoreovirus的呼肠孤病毒和由两个叶蝉发送pecies ，黑尾叶蝉和Recilla dorssalis （ Boccardo和米尔恩，1984）。RDV基因组由12个双链RNA片段（ S1到S12）的。S1，S2 ，S3， S7和S8的编码结构蛋白，而S4，S6 ， S9，S10 ， S11和S12编码非结构蛋白（ Xu等，1998; Zhang等， 1997） 。近日， Pns6被鉴定为一种病毒移动蛋白和Pns10作为RNA沉默抑制RDV的（ Li等人， 2004年，曹等人， 2005） 。 P2蛋白被确定为互动，体内与在赤霉素的酶（GA）的生物合成途径以及这一相互作用导致GA减退积累和对矮化表型表现出byRDV感染的水稻植物（ Zhu等，2005）。第八大段（ S8 ）编码外层外壳蛋白（铃木和菅原， 1991） 。 外壳蛋白介导的抗性（ CPMR ） ，一种策略是指病毒电阻通过在转基因植物病毒外壳蛋白的表达介导的，是一个来源于病原体的抵抗力（ ;威尔逊，1993 Lomonnossoff ， 1995）的例子。由于CP的转基因烟草具有显著抵抗的第一次报告烟草花叶病毒的感染（鲍威尔- Abel等，1986）， CPMR已被广泛地应用于一个广阔植物品种和一些病毒成员表现出不同程度的成功的。大部分CPMR的例子都涉及病??的单链RNA的基因组和双子叶植物物种（格鲁梅特，1995）。在水稻中，最重要的一个的情况下谷类植物为主要食物来源，为人类特别是对人的发展中国家，病毒外壳蛋白基因的抗病毒转基因植物制作了防治水稻条纹叶枯病， tenuivirus的成员（ Hayakwa等， 1992） 。 RDV外层外壳蛋白的转化被提及的报告Matsumura等。没有进一步的分析（松村和田林， 1995） 。最近Sivamani等。 （ 1999）报道CP-介导的保护对水稻东格鲁球状病毒（ RTSV ）在转基因水稻植株。之前我们已经报道 水稻与S8的基因编码的大米的外壳蛋白转化矮缩病毒通过粒子轰击（ Zheng等， 1997） 。在这里，我们提出在S8中的转基因和抗RDV在T1的特性数据和T2代。 材料和方法 植物材料。转基因水稻植株行T0-2表达RDV S8的基因 通过粒子轰击（Zheng等，1997），并获得自交得到的种子。 T1和T2代的苗在随后的研究中使用。 PCR分析和Southern杂交。总DNA进行从叶中提取 转化的和未转化的水稻植物的根据默里组织和 汤普森（1980）。对于分离分析，聚合酶链反应是 以阐明S8序列中的T1和T2子代的存在 原代转基因水稻品系T0-2。用于PCR的引物和条件 人所描述的郑等人一样。 （1997）。对于南方的分析，基因组DNA用XhoI消化并用探针含有1.4kb的片段 S8编码区所描述的郑等人。 （1997）。 在T1和T1的后代RDV外层外壳蛋白的Western blot分析。总 蛋白质被同时从转基因植物和非转化的植物中提取和 使用兔多克隆引发抗血清进行Western印迹 RDV，所描述的郑等人。 （1997）。 病毒耐药检测。已被允许访问72小时叶蝉 到RDV感染的植物被用于接种。 10?12天龄的稻 苗接种单株3带毒成虫，并保持在 腾笼换24小时的访问期间。叶蝉，然后取出，将植物 转移到防虫笼和维护温室。外观 症状是经过12-28天拿下。 结果 在S8基因T1和T1后代的分离分 在我们以前的研究中，转基因水稻植株T0-2表达RDV外层被毛 蛋白质获得与自交T1后代显示出1:1的分离比 在S8转基因（