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专题18基因工程和细胞工程;【高考这样考】
(2015·全国卷Ⅱ·T40·15分)已知生物体内有一种蛋白质(P),该
蛋白质是一种转运蛋白,由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位
的丝氨酸变成亮氨酸,240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸,改变后的蛋
白质(P1)不但保留P的功能,而且具有了酶的催化活性。回答下列问
题:
(1)从上述资料可知,若要改变蛋白质的功能,可以考虑对蛋白质的
___________________进行改造。;(2)以P基因序列为基础,获得P1基因的途径有修饰__基因或合成__基
因。所获得的基因表达时是遵循中心法则的,中心法则的全部内容包
括_____________________的复制;以及遗传信息在不同分子之间的
流动,即:_________________________________________________
______。
(3)蛋白质工程也被称为第二代基因工程,其基本途径是从预期蛋白
质功能出发,通过_________________和_______________,进而确
定相对应的脱氧核苷酸序列,据此获得基因,再经表达、纯化获得
蛋白质,之后还需要对蛋白质的生物_____进行鉴定。;【考纲考频】
1.基因工程的诞生 Ⅰ(5年2考)
2.基因工程的原理及技术 Ⅱ(5年15考)
3.基因工程的应用 Ⅱ(5年10考)
4.蛋白质工程 Ⅰ(5年7考)
5.植物的组织培养 Ⅱ(5年9考)
6.动物细胞培养与核移植技术 Ⅰ(5年6考)
7.动物细胞融合与单克隆抗体 Ⅱ(5年8考);【考查特点】
1.基因工程:基因工程一直是生命科学研究和争论的焦点,围绕其基本工具和操作步骤而展开的高考命题更是考查的热点。多与蛋白质工程、细胞工程结合命题。以非选择题形式考查。
2.细胞工程:考查重点是植物组织培养技术和制备单克隆抗体,主要涉及二者的基本概念及原理、培养过程及条件等。以非选择题形式考查。;一、基因工程
1.基本工具:
(1)限制性核酸内切酶(限制酶)。
①作用:获取_____________和切割_________,断开两个核苷酸
之间的_______________。
②特点:_________特定的核苷酸序列,并在特定的位点进行
_________。
③结果:形成_________末端或平末端。;(2)DNA连接酶。
①种类:
a.E·coliDNA连接酶:来源于大肠杆菌,连接黏性末端。
b.T4DNA连接酶:来源于T4噬菌体,连接黏性末端或平末端。
②作用:恢复被限制酶切开的磷酸二酯键,用于构建_____________。;(3)载体的特点和作用。
①能够在细胞内自我复制:稳定保存。
②具有一个至多个限制酶切割位点:__________________________。
③具有特定的标记基因:__________________________。;2.基本操作程序:
(1)目的基因的获取。
(2)_______________________。
(3)将目的基因导入受体细胞。
(4)目的基因的_______________。;二、蛋白质工程
1.步骤:
(1)预期蛋白质_________;(2)设计蛋白质_________;
(3)推测_______________;(4)确定___________________;
(5)鉴定蛋白质的_____________。
2.产物:产生自然界中从来没有的_______________。;三、细胞工程
1.植物细胞工程:
(1)理论基础:_________________。
(2)植物组织培养的重要步骤:___________和___________。
2.动物细胞工程:
(1)常用技术手段:动物细胞培养、_____________________、
动物细胞融合、制备单克隆抗体等。;(2)动物细胞培养。
①常用的酶:_____________。
②培养基:_______________。
(3)动物细胞融合。
①原理:___________________。
②诱导因素:_____________、灭活的病毒、电激等。;考点一 基因工程
【典例1】(2015·全国卷Ⅰ·T40)HIV属于逆转录病毒,是艾滋病的
病原体。回答下列问题:
(1)用基因工程方法制备HIV的某蛋白(目的蛋白)时,可先提取HIV中
的____,以其作为模板,在_________的作用下合成____________,
获取该目的蛋白的基因,构建重组表达载体,随后导入受体细胞。;(2)从受体细胞中分离纯化出目的蛋白,该蛋白作为抗原注入机体
后,刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是_____。该分
泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV,检测的原理是____________
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